重组嗜热蔗糖磷酸化酶在E. coli中的分泌表达文献综述-文献综述网

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1. 蔗糖磷酸化酶1.1 蔗糖磷酸化酶简介蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase，SPase，EC 2.4.1.7）能够催化转移葡萄糖苷键，是催化糖苷合成的一类重要的酶[1-2]。

主要催化反应类型有两种：(1)将1-磷酸葡萄糖中的葡萄糖基转移至相应受体；(2)将蔗糖水解并可转移葡萄糖基至相应受体，受体可以为水、无机磷酸、含酚羟基和醇羟基等物质。

该酶可利用淀粉、蔗糖、乳糖等来源广泛的原料，合成商业价值更高的产品，在食品、化妆品添加剂等行业均有的应用[3]。

1.2 重组嗜热蔗糖磷酸化酶虽然蔗糖磷酸化酶具有良好的受体特异性，但低热稳定性限制了该酶的工业化应用，所以如何提高该酶的热稳定性是当前的研究热点之一[4]。

热稳定的酶在工业应用中具有许多优点，例如，反应效率随温度的提升而提高，以致反应过程以及其下游的分离纯化过程的经济效益更好。

嗜热菌历来是热稳定酶的主要来源[5-6] ， Verhaeghe 等[7] 为了得到热稳定性较强的酶，从嗜热菌Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum 中鉴定出蔗糖磷酸化酶，该酶在60℃下的半衰期达到60 h。

于丽[8]对长双歧杆菌蔗糖磷酸化酶进行了生物信息学分析，得到用于突变的目标位点，并对突变酶进行了重组表达、纯化和性质研究，验证获得了稳定性提高的突变酶。

2. 大肠杆菌2.1大肠杆菌的特点大肠杆菌(E.coli)是自然界中最为人们所熟识的生物体之一, 具有遗传背景清楚、繁殖快、成本低、表达量高、表达产物容易纯化等优点, 是基因表达技术中发展最早和目前应用最广泛的是经典表达系统, 在大多数科学研究及应用开发中作为实现蛋白表达的首选宿主 [9] 。

2.2 大肠杆菌表达系统大肠杆菌（E.coli）表达系统是发展最早，目前应用最广泛的表达系统之一。

它具有遗传背景清楚、操作简单、繁殖快、表达量高等优点。

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