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介绍:黄素单核苷酸(flavin mononucleotide),亦称核黄素-5-磷酸,是一些黄素酶的辅基,与酶蛋白以非共价键结合,但结合紧密,FMN分子中所含的是核糖醇,所以也称为磷酸核黄素.FMN分子中的异咯嗪部分可以进行可逆的脱氢和加氢反应,能传递两个氢原子.通常黄素核苷酸每次传递二个氢原子,但有时在正常循环中每次也可传递一个电子或一个氢原子,产生半还原(或半醌)形式的黄素核苷酸。
核黄素的研究进展:目前微生物发酵法是核黄素商业化生产的主要方法,世界上三大核黄素生产商(湖北广济药业、德国的巴斯夫、荷兰的德斯曼)都采用微生物发酵法。
不同的核黄素生产企业采用的原料不尽相同,主要有植物油、葡萄糖、糖蜜、玉米浆和大米等。
发酵法生产核黄素的菌种有枯草芽孢杆菌(B.subtilis),棉囊阿舒氏酵母(Ashbyagossypii),解朊假丝酵母(Candidafamata),阿舒氏假囊酵母(Eremothecium ashbyii)等。
目前生产上采用的都是经过基因改造的基因工程菌。
核黄素分离纯化成本约占整个生产成本的40%,核黄素的分离提取的方法有:酸溶法、碱溶法、直接离心分离法、膜分离法等,其中,碱溶法在工业上的应用比较普遍,该方法是利用核黄素在碱性溶液中的高溶解度,通过调节发酵液pH值,使核黄素溶解,通过离心除去菌体、蛋白质等杂质后再经过结晶、重结晶得到核黄素。
核黄素检测方法有微生物法、紫外分光光度法、直接荧光法、光黄素测定法、高效液相色谱法、磷光法、离子对色谱法、化学发光法等。
由于微生物发酵法生产核黄素具有工艺简单、产品易于分离纯化、环境污染小和成本低廉等优点,所以核黄素生产厂商主要采用微生物发酵法生产核黄素。
机理:能够过量生产黄素单核苷酸的产黄酵母假丝酵母念珠菌由包含强组成型驱动的编码核黄素激酶的FMN1基因和翻译延申因子1a组成。
这些包含FMN1基因质粒的菌株在TEF1启动子下的转化增加了200倍。
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