定点突变提高γ-谷氨酰转肽酶的pH耐受性及催化活性文献综述

 2021-09-25 01:33:19

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文 献 综 述1. γ-谷氨酰转肽酶的简介γ-谷氨酰转肽酶 (γ-glutamyltranspeptidas,eγ-GTP, E2.3.2.2),又称γ-谷氨酰转移酶,在生物体内广泛存在,是谷胱甘肽(GSH)代谢的关键酶之一,参与谷胱甘肽 环和氨基酸跨膜转运的异二聚体酶, 它能专一性地催化γ-谷氨酰基的转移,具有转肽、自转肽、水解3种催化作用。

起先,人们在 GSH代谢中研究γ-GTP所起的作用,随着研究的深入,人们对 GTP的催化功能和分子结构有了更多的了解,利用其对谷氨酰基的催化水解和转肽特性可以催化合成多种γ-谷氨酰化合物,如谷胱甘肽、谷胱二肽和茶氨酸等。

[1]该反应包括了酶的酰基化(Acylation)和脱酰基化(Deacylation)两个步骤。

由于该过程位点特异性和光学选择性强,无需对反应物进行保护和脱保护,反应过程中不消耗ATP。

因此,GGT催化的谷氨酰基化反应已成为生物催化领域的研究热点。

但在该酶的实际应用中却发现其热稳定性较差,在55 ℃下GGT的酶活半衰期仅有90 min。

酶的热失活是限制酶制剂工业生产和应用的重要因素,如何提高酶在工业环境下的稳定性是近年来生物化工领域研究的热点。

目前,提高酶稳定性方法主要有:固定化法、化学修饰、基因工程技术、添加稳定剂法。

固定化法、添加稳定剂法、化学修饰法已有相关研究发表[2]。

酶的化学本质是蛋白质,其催化作用具有高选择性、高催化活性、反应条件温和、环保无污染等特点。

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