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文献综述
文 献 综 述1.1选题背景近年来,由于抗生素的滥用,耐药性细菌广泛出现,对人体健康的威胁日益严峻.随着临床用药的选择不断减少,迫切需要开发新的抗菌药物,特别是新作用机制的抗菌分子来对抗出现的耐药菌.细胞分裂温度敏感.突变体Z作为细菌分裂的必需蛋白质,是目前研究最热门的作用靶点之一.FtsZ是一高度保守的蛋白质,在大多数原核细胞的细胞分裂中发挥着关键作用,本文回顾了大肠杆菌FtsZ蛋白原核表达条件的优化和无痕敲除大肠杆菌FtsZ基因的方法。
1.2选题目的大肠杆菌细胞骨架蛋白FtsZ 是细菌细胞分裂所必需的调控蛋白,其生物学功能与微管蛋白极其相似,被认为是微管蛋白的同源蛋白。
Ec-FtsZ具有GTPase活性,在GTP存在条件下,Ec-FtsZ可在细菌内膜中心聚集形成多聚体,进而形成可收缩的Z环 (Z ring)。
Z环形成后,其他分裂调控蛋白陆续结合到Z环骨架上形成分裂体。
分裂体通过提供细菌细胞缢缩力和酶活力使Z环缩小以形成隔膜,完成细菌细胞的二分裂过程。
由于FtsZ在大多数致病菌细胞分裂过程中发挥高度保守的调控作用,细菌的FtsZ与真核生物微管蛋白结构差异较大且不易突变,其已成为抗感染药物开发的理想靶标之一。
因此,深入研究Ec-FtsZ在大肠杆菌Z环形成和定位中的调控功能对新型抗耐药菌药物研发具有重要意义。
2表达条件优化2.1最佳诱导时间工程菌以不同的诱导时间培养后,等量收集菌体,以10%SDS-PAGE鉴定Ec-FtsZ表达情况。
在诱导温度为30℃、25℃和20℃时,Ec-FtsZ均明显表达。
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