产富马酸基因工程菌的构建文献综述

 2021-09-27 00:02:51

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文 献 综 述

1、富马酸酶简介

富马酸酶(Fumarase, EC 4.2.1.2),又名富马酸水合酶、(S)-苹果酸裂合酶,是一种胞内酶,主要存在于动物、植物和微生物细胞中。在真核生物中存在于细胞质和线粒体;原核生物中一共存在着三种形式的富马酸酶,分别由三种不同的基因fumA、fumB和fumC编码。

所有的富马酸酶根据其性质的不同可划分为两大类:

第一类富马酸主要存在于原核生物中,一二聚物的形式存在,对热不稳定。它的活性表达依赖于其活性位点上的一个(4Fe-4S)离子区域,分子量为120kDa。基因fumA和fumB的表达产物都属于第一类富马酸酶。

第二类富马酸酶广泛存在于动物、植物和真核微生物细胞的细胞质和线粒体中,

比如:猪心细胞,老鼠、兔子的肝脏细胞以及酵母[1]等等。另外,原核生物基因fumC的表达产物也属于此类。与第一类不同的是,这类富马酸酶在细胞中以四聚体的形式存在,具有热稳定性,活性表达不依赖于离子,分子量为200kDa。

大肠杆菌中含有以上两类富马酸酶(基因fumA、fumB以及fumC的表达产物)。当细胞进行厌氧生长时,第二类富马酸酶,即fumC编码的富马酸酶起主导作用,占据了全部富马酸酶活性的80%;当细胞进行有氧生长时,fumC编码的富马酸酶浓度较低,而第一类富马酸酶的活性占据主导地位。

2、 2、米根霉中富马酸的代谢途径

在米根霉的葡萄糖代谢模型中[2],存在两条富马酸代谢途径,如下图:

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