Akt信号通路在肿瘤的发生发展中起到重要作用，金纳米分子信标为近年来新研究出的一种检测细胞内mRNA的方法。所以本实验拟运用自行合成的分子信标对其癌细胞内的Akt mRNA进行检测。
课题背景：
Akt，又称蛋白激酶B(protein kinase B, PKB) ，，是致小鼠白血病的病毒癌基因v-Akt 所编码的癌蛋白在正常细胞内的同源物， 其分子量约为60KD，是原癌基因c-akt表达编码的一种丝氨酸。其持续活化与肿瘤的发生、发展密切相关,。Akt信号通路在绝大多数人类肿瘤中表达失调，调节着肿瘤细胞的增殖和凋亡，并且与肿瘤的血管形成和侵袭转移以及对化学耐药、放疗抗拒密切相关，目前以该通路为靶点的肿瘤治疗倍受关注。Akt 信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一, 通过影响下游多种效应分子的活化状态, 在细胞内发挥着抑制凋亡、促进增殖的关键作用,它与人类多种肿瘤的发生发展密切相关。
- Akt 信号通路在肿瘤细胞中的重要作用
Akt 信号通路在大多数恶性肿瘤中的表达都发生了改变。近年来的研究发现在多种肿瘤组织如卵巢癌、结直肠癌、淋巴瘤、胰腺癌、非小细胞肺癌、淋巴瘤及胃癌等中都有Akt 的过度表达和活化［1~4］。目前研究证实Akt 信号通路在多种肿瘤中表达异常，且与肿瘤的转移、预后等密切相关。
近年来研究表明, Akt信号通路能经多种途径抑制细胞凋亡, 促进细胞存活。多细胞生物通过细胞增殖和凋亡来维持自身的稳定, 若两者之间的动态平衡失调, 则可导致肿瘤的发生。细胞凋亡是机体细胞在正常生理或病理状态下发生的一种自发的、程序化的死亡过程, 它的发生受到机体的严密调控。目前认为, 细胞内的基因直接控制着细胞凋亡的发生和发展,而细胞外部因素通过信号转导影响这些细胞内基因的表达或其表达产物的活化, 从而间接地调控细胞凋亡。细胞凋亡异常与多种疾病的发生发展有着直接的联系, 包括肿瘤、病毒性疾病及多种退行性病变。研究表明, 组成性活化的PI3K-Akt 信号通路在广泛的人类肿瘤谱中失调，Akt 信号通路对于细胞的增殖和凋亡的调节是必需的, 其活化与人类肿瘤的发生发展密切相关。［5］
Akt 信号转导通路亦影响肿瘤的转移。肿瘤细胞的迁移和黏附在肿瘤侵袭转移中起着重要的作用。抑制Akt1 活性可降低肿瘤细胞的迁移性。［6］
综上，PI3K/Akt信号通路在肿瘤细胞中的异常激活，促进肿瘤细胞恶性增殖、侵袭转移能力，在肿瘤的发生发展中具有重要的作用。研究Akt信号通路，及ATK蛋白对肿瘤细胞的检测和诊断具有重要的意义。因此本实验拟合成一种荧光分子探针，实现对AKT mRNA的检测。
2.传统检测方法
传统的对于信号通路上蛋白的研究方法主要是RT-PCR及westenblot的方法分别从核酸及蛋白的角度进行研究。这些方法虽然得到了普及应用，但是同时存在操作复杂，检测周期长等弊端。
3.应用金纳米荧光分子信标的检测方法
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