一、课题背景
口腔含漱剂[1]作为一种口腔保健品,主要体现在杀菌、预防和保健等方面。口腔含漱液可以直接作用于病变的部位,不需经过肠道,避免了药物在肠道时被酶分解。
亚麻籽胶[2]是一种新型天然亲水胶体,具有黏度高、乳化性强、保湿性和悬浮稳定性等特点。羧甲基壳聚糖[3]是壳聚糖经羧甲基化后的一类甲壳素衍生物,含有丰富的羧基和氨基,通过1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC),和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)共催化交联羧甲基壳聚糖形成新型水凝胶[4]。羧甲基壳聚糖对口腔变形链球菌、口腔乳酸杆菌都有一定的抑菌性。聚赖氨酸是有微生物白色链霉菌发酵合成的一种由赖氨酸单体通过ε-酰胺键形成的多肽[5],ε-聚赖氨酸对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌,以及一些病原体均有抑制作用,具有很强的广谱抑菌性[6],可直接吸附到细胞膜上,最终导致细胞死亡,或者抑制细菌的呼吸作用,同时作用于细胞膜和蛋白合成系统,与核糖体结合抑制蛋白和酶的合成,从而达到杀菌目的。纳他霉素也称游链霉素,是由一种链霉菌经生物技术精炼而成的生物防腐剂,为无色无味白色粉末,对霉菌、酵母、丝状真菌具有极强的抑制或杀灭作用[7]。有机硅季铵盐是一类新型阳离子表面活性剂,其杀菌机理是以有机硅作为媒介,铵阳离子基团的吸附于细菌的表面,改变细菌细胞壁的通透性,使菌体内的酶、辅酶和代谢中间物溢出,致使微生物停止呼吸功能而致死,从而达到杀菌抑菌的作用,即发生接触死亡[8]。
- 要解决的问题
治疗放疗导致的唾液腺损伤引起的长期性口干问题或一般性的口干问题,清除口腔细菌和异味,通过杀菌抑菌的作用达到清除口腔的目的。
- 可行性分析
制备出亚麻籽胶,和羧甲基壳聚糖、聚赖氨酸、纳他霉素、有机硅季铵盐作用,按照一定比例制备出口腔含漱剂,通过抑菌试验检验口腔含漱剂对口腔中的细菌能否具有杀菌作用,以此看来是可行的。
- 研究方法和内容
- 测亚麻籽胶的粘度
使用NDJ-8S旋转粘度计测定
- 开机前将黄色保护盖取下,显示屏亮,但电机不工作,预热20min
- 估计被测样品的粘度,按照量程表选取转子,将选用的转子旋如链接螺杆
- 使用升降台使样品上升,或旋动粘度计升降架,使粘度计缓慢下降,转子逐渐浸入样品中,直至转子上的标记与液面相平为止,保护架、转子在容器中心,调整粘度计位置至水平
- 转子在样品中浸泡3min,使转子温度与样品温度一致
- 按测量键开始测量,当转子在液体中旋转20圈以上读数
- 测羧甲基壳聚糖的含量
用乙酰丙酮法测定羧甲基壳聚糖含量
- 原理
氨基葡萄糖在碱性条件下加热,乙酰丙酮将氨基葡萄糖分子2号位上的氨基乙酰化,生成带有吡咯环的N-乙酰衍生物,该衍生物与对二甲氨基苯甲醛反应,反应物呈红色,于525nm测定吸光度。
- 测定方法
精密称定羧甲基壳聚糖干燥品30mg,置5ml安剖中,加5ml 6mol/L盐酸,封口后沸水浴中水解2.5h,冷却,完全转移至烧杯中,用6mol/L NaOH溶液调节至中性,定容至100ml,精密移取5ml,加水稀释至25ml,即得样品溶液,取样品溶液3ml,加水稀释至5ml,再加乙酰丙酮溶液1ml,加无醛乙醇至10ml,混匀,60℃水浴保温1h,冷却,在525nm下测定吸光值,通过回归方程计算含量[9]。
- 探究两者的配制比例
- 测聚赖氨酸、纳他霉素、有机硅季铵盐的抑菌性
(1)培养基的配置
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