开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 研究内容
固有免疫(innate immunity)是机体在种系发育和进化过程中形成的天然免疫防御功能,即出生后就已具备的非特异性防御功能,也称为非特异性免疫(non-specific immunity)。是生物在长期进化过程中形成的一系列防御机制。天然免疫是机体对多种抗原物质的生理性排斥反应。与此相对应的是适应性免疫(adaptive immunity),指出生后通过与抗原物质接触所产生的一系列防御功能。
影响固有免疫的因素有许多,我们想探讨的就是LEV3基因编码的蛋白对固有免疫有怎样的影响。这我们的毕业设计任务就是:
1.目标基因的引物设计
2.分子克隆
3.构建目的基因的连接产物并表达,蛋白质的初步研究
分子克隆技术是本实验需要重点攻克的难题,它是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。将目的基因用体外重组方法将它们插入克隆载体,获得连接产物,通过转化与转导的方式,引入适合的宿主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的宿主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。
它包括PCR引物设计,以及PCR产物回收,酶切连接,质粒提取,大肠杆菌感受态转化等。很多环节会影响实验的成败,如酶切的好不好、回收的质量好坏、连接时的浓度或比例、感受态等。
二、研究方法与技术路线
根据目的基因序列进行引物设计
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