开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 研究背景
WHO数据显示,抑郁症(Major Depressive Disorder,MDD)每年影响全球超过3亿人精神健康。近年来随着抑郁症患病率快速增加,抑郁症的治疗成为热门话题。
色氨酸(Tryptophan,Trp)是一种人体必需氨基酸,只能从膳食中获取,由L-型氨基酸转运蛋白 1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)转运进入脑组织。在脑内,与抑郁症相关的色氨酸代谢通路有两条:其一是5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)代谢通路,限速酶是色氨酸羟化酶2(Tryptophan hydroxylase,TPH2);其二是犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)通路,且哺乳动物体内90%以上的Trp通过这条通路代谢,关键酶是吲哚胺-2,3-双加氧酶(Indoleamine -2,3- dioxygenase,IDO),有研究表明犬尿氨酸的代谢物具有神经毒性,可能与抑郁症的发病机制相关。抑郁症患者通常被检测出的血浆及脑组织中Trp水平下降,而犬尿氨酸通路过度激活的现象。
艾灸是一种传统中医疗法,使用点燃的艾在体表穴位散发热量。临床上使用艾灸“大椎穴”与五羟色胺再摄取抑制剂(Selective Serotonin Reuptake Inhibitor,SSRI)类药物合用治疗抑郁症,取得明显疗效提高。然而,目前的临床上使用艾灸辅助治疗抑郁症主要采用依据经验制定的方案,这导致疗效差异大。而现阶段艾灸改善抑郁症的机制尚不明确,这导致标准化的艾灸方案难以制定。为了标准化地制定艾灸治疗方案,更好地辅助药物治疗抑郁症,本研究探究了热效应对Trp转运与代谢的影响,希望能深入了解艾灸改善抑郁症的机制,为临床艾灸的方案制定提供依据 [1]。
- 研究方案
- 动物及分组
1.1动物选择:选择雄性Wistar大鼠。
1.2动物分组:将72只大鼠分为:(1)正常对照组,(2)正常对照组+Trp组(腹腔注射Trp 100mg/kg),(3)LPS造模组,(4)LPS造模 Trp组,(5)LPS造模 Trp+艾灸治疗组1(距离5cm, 治疗时长30min),(6)LPS造模 Trp+艾灸治疗组2(距离5cm, 治疗时长10min)。每组12只大鼠分为3小组用于不同时间的取脑。
2.建立大鼠抑郁模型及给药
根据文献报道,腹腔注射脂多糖(LPS)可以诱发大鼠的抑郁样行为[2],在24h内即可造成大鼠急性抑郁模型。即根据文献报道的方法,选择雄性Wistar大鼠腹腔注射0.5mg/kg LPS建立大鼠急性抑郁模型。并在LPS给药后2h,进行Trp给药。
3.探究热效应对LPS诱发抑郁样大鼠Trp转运和代谢的影响
在给予大鼠Trp后于0min、10min、30min、1h、1.5h、2h、3h和5h采集每个大鼠的血浆样品测定Trp和Kyn含量变化。并在给予Trp后1,2和5h采集脑组织样品测定其中Trp、Kyn和5-HT水平的变化。探究不同热效应对血浆和脑组织中Trp转运的影响以及对海马组织中Trp及其代谢物含量的改变。
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