一、研究问题:
胶束作为一种纳米制剂,其具有被动靶向,延长半衰期等优点。但因为缺乏特异性,导致药效不尽如意。本课题采用实验室研发的国家一类新药HM-3多肽药物,作为主动靶向“弹头”。其具有RGD序列,可以与肿瘤细胞膜上alpha;vbeta;3,alpha;5beta;1受体结合,实现靶向肿瘤的效果。
本课题组采用硬脂酸对多肽HM-3进行修饰,增加其脂溶性,更好与胶束 结合,实现提高药效,靶向肿瘤,同时延长体内循环半衰期,改善体内药代动力学特性,降低给药频率的目的。
本论文针对胶束中s-HM-3和紫杉醇的体内药代动力学进行研究,分别通过ELISA和HPLC进行分析研究。
二、研究手段:
(一)ELISA法测定s-HM-3浓度
- 实验方法建立
1.1 样品制备
每只老鼠以4.2mg血液每公斤体重进行眼眶取血,每只200-500mu;L,迅速离心12000rpm 3min ,取上清,按体积比1:2加PBS,80℃水浴30min,12000rpm 3min取上清,-20℃冻存备用。取血点是0h,0.5h,1h,2h,4h,8h,12h,24h.
1.2抗原的偶联制备
采用戊二醛二步法:取12mg牛血清白蛋白(BSA)溶解于1mL 0.1mol/L PBS(pH7.2),加新鲜配制的1.5%戊二醛(GA)溶液1.5mL,于室温反应 6h。将反应液于0.01mol/L PBS(pH7.2)中4℃透析过夜。在透析内液中加入6mg PBS 溶解的 HM-3,反应10小时,对0.01mol/L PBS(pH7.2)中4℃透析过夜。收集透析内液,EP管分装每管20mu;L,于-20℃保存。
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