开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一.本课题的意义:
单纯疱疹病毒(herpessimplexvirus,HSV)是最早发现的引起人体致病的疱疹病毒,该病原体呈现出普遍性、接触传染性、潜伏性、复发性,人是单纯疱疹病毒的唯一自然宿主。病毒经呼吸道、口腔、生殖器粘膜以及破损皮肤进入体内,潜居于人体正常粘膜、血液、唾液及感觉神经节细胞内。原发性感染多为隐性,大多无临床症状或呈亚临床表现,仅有少数可出现临床症状。原发感染发生后,病毒可长期潜伏于体内。正常人群中约有50%以上为本病毒的携带者。HSV在人体内不产生永久免疫力,每当机体抵抗力下降时,如发热、胃肠功能紊乱、月经、妊娠、病灶感染和情绪改变时,体内潜伏的HSV被激活而发病。单纯疱疹病毒根据血清型分为两类:HSV-1、HSV-2,两类病毒在显微镜下形态没有明显差别,均可以引起口面部感染及生殖器感染,但HSV-1主要感染腰部以上区域,HSV-2主要造成生殖器感染。
研究显示HSV表面糖蛋白与病毒感染的吸附和侵入有关,尤其gD糖蛋白是HSV-1的主要免疫原,可以诱导细胞和体液免疫应答,是抗HSV感染中最重要的保护性抗原。本课题针对I型单纯疱疹病毒表面抗原gD进行研究,纯化出针对其的单克隆抗体对其进行鉴定。制备抗HSV1-gD的单克隆抗体,可用于ELISA试剂盒的研制、WesternBlot、亲和色谱柱的制备及基于亲和原理纯化检测方法的建立,对HSV1的实验研究及临床预防、诊断及鉴定奠定了基础。
二.研究的目标、内容和拟解决的关键问题
1、研究的目标
1)HSV-1gD抗原的纯化制备及鉴定;
2)制备出针对gD1的单克隆抗体;
3)单克隆抗体的纯度及特异性鉴定。
2、研究的主要内容
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