一、研究背景与目的 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸作为生物体内最重要的氧化还原代谢物,不仅参与细胞代谢、信号转导以及细胞生长、增殖和衰老、死亡密切相关,也与相关疾病如癌症、糖尿病、肥胖症、心脑血管疾病等的发展密切相关。
然而依赖于细胞裂解的传统生化方法难以在活细胞、亚细胞以及活体水平原位实时追踪代谢物变化,更难以应用于高通量的化合物或基因筛选,严重制约了相关领域的发展。
而小分子荧光探针具有灵敏度高、选择性好、较高的空间和时间分辨率、操作方便等优点而被广泛应用。
本课题以BODIPY为荧光母体,通过乙烯基与喹啉鎓相连起来,基于NADH的还原性,可以与荧光探针反应后改变其共轭体系,从而实现对NADH的高灵敏性检测。
此外,并对其化学体系进行如下几方面考察,包括探针与NADH反应前后的光谱变化、线性范围、pH稳定性和温度稳定性。
二、工作安排和进度 2月25日3月6日 查阅文献,确定选题; 3月6日3月15日 整理相关材料,完成开题报告; 3月20日5月7日 开展实验研究,获取实验数据; 5月8日5月20日 整理实验数据,完成毕业论文初稿; 5月21日5月27日修改毕业论文初稿,完成最终毕业论文定稿; 5月28日6月8日 进行毕业论文审评,完成毕业论文答辩。
三、文献综述用于检测NADH的荧光探针摘要:NADH是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的还原型,NAD+为其氧化型,自1962年至今被发现已58年了,作为生物体内许多氧化还原反应的辅酶,参与生物体内许许多多生命活动,在维持细胞生长分化、能量代谢和呼吸链电子传递及细胞保护方面尤为重要。
近年来,荧光标记技术在生物技术领域起着广泛而重要的应用。
本文将重点介绍NADH的重要性与其检测手段的发展。
关键词:NADH;荧光探针0 前言NADH/NAD+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)作为我们生物体内最重要的辅酶之一,没有这对辅酶,我们体内的大部分能量运动无法正常进行,因此设计合成出一种能够检测生物体内NADH的荧光探针,其意义在于可以针对性地检测NADH/NAD+浓度变化,进而帮助我们更好地了解体内细胞的代谢情况。
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