文献综述甾体类化合物,由三萜环化再经分子内部重组和化学修饰而成,属于类异戊二烯物质,包括固醇(胆固醇、羊毛固醇、谷甾醇、豆固醇、麦角固醇),胆汁酸和胆汁醇,类固醇激素(肾上腺皮质激素、雄激素、雌激素)昆虫的蜕皮激素,强心苷和皂角苷配基以及蟾蜍毒等。
人工合成的类固醇药物如抗氧剂如氢化泼尼松、地塞米松,促进蛋白质合成的类固醇药物和口服避孕药等,在医药领域发挥着至关重要的作用。
诸多研究表明,通过生物转化或者化学合成的方法修饰甾体的结构,其结构的微小变化,却能使化合物的生物活性发生巨大变化。
而生物转化方法相较于传统的化学合成方法更有效而环保。
例如,1952年Murray等利用黑根霉转化孕酮素,仅用一步就在C11位上引入了羟基,从而简化了孕酮合成皮质酮反应 [1]。
这一伟大发现也激发了微生物学、有机化学和药物学领域逐渐重视甾体的生物转化研究。
一、甾体生物转化反应的主要位点微生物具有强大的酶系,对甾体化合物生物转化的主要反应及位置如图1所示: 图1 甾体类化合物生物转化主要反应与位点二、甾体化合物的生物转化研究2.1胆固醇侧链24-和25-羟基化反应Putkaradze[2]在大肠杆菌细胞中构建了CYP109E1的全细胞体系,这一系统的催化活性比巨大芽孢杆菌系统高3.3倍,可产生约45mg/L胆固醇衍生物:24-羟基胆固醇(P1)和25-羟基胆固醇(P2),见图2。
图2 CYP109E1对胆固醇的生物转化2.2 睾酮和庚酸睾酮的6beta;-和14alpha;-羟基化反应4种真菌[3]: Absidia griseolla var. igachii PTCC 5260, Acremonium chrysogenu PTCC 5271, Fusarium fujikuroi PTCC 5144和 Fusarium solani complex PTCC 5285可羟基化睾酮和庚酸睾酮,研究表明:F.fuikuroi和F.solani转化庚酸睾酮可产生三种代谢物(睾丸酮、雄激素-4-烯-3、17-二酮和6beta;-羟基睾酮),其中6beta;-羟基睾酮是主要代谢产物;A. griseolla和A. chrysogenu转化产生的14alpha;-羟基睾酮为主要代谢物,与睾酮、6beta;-羟基睾酮共同作用于下丘脑,见图3和4。
图3. 灰口艾布氏菌和金顶孢霉对庚酸睾酮的生物转化 图4. 藤库氏镰刀菌和灰横霉对睾酮的生物转化2.3孕酮的14alpha;-羟基化反应Shang-hui Hu[4]利用T.piriforme进行对孕酮进行生物转化,得到14alpha;-羟孕酮(1a),再通过重复的其他柱色谱法得到9alpha;-羟基孕酮(1d)。
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