南美白对虾病害调查——2018-2019南通地区南美白对虾苗种肝肠胞虫携带情况调查及分析文献综述

 2023-09-08 09:10:34

文献综述

南美白对虾，又名万氏对虾、白对虾，原产于中、南美洲太平洋沿岸的温暖水域，与斑节对虾、中国对虾并列为世界三大养殖虾类，是集约化高产养殖的优良品种。近年来，因其具有生长快、抗病力强、耐高密度养殖、肉质鲜美、含肉率高等特点，逐渐成为我国重要养殖虾种[1]。

南美白对虾蛋白质含量高，具有很高的食用价值。同时，南美白对虾也是一种具有较强保健功能的海产资源。研究发现南美白对虾的氨基酸种类齐全（含有18 种氨基酸），含有多种不饱和脂肪酸，比如亚麻酸、DHA、EPA等，其中DHA 和 EPA 是人体必需脂肪酸[2]，对人体细胞膜功能和基因表达有重要作用[3]，能促进儿童智力发育并对心血管疾病和老年性痴呆具有疗效，此外它们还具有较好的抑癌效果[2，4-6],除了上述这些，南美白对虾还富含钾元素以及多种维生素，均对人体健康有利。

自1988年由中国科学院海洋研究所首次将南美白对虾从美国引进，在我国研究推广至今，已有25年。近几年来，随着养殖技术的成熟及推广面积的增大，南美白对虾产量年均保持7%~8%的增长速度且占对虾产量的比重越来越大[7]。而虾肝肠胞虫作为养殖对虾的重要病原，近年来各地都有检出的报道，且呈上升趋势，该寄生虫正严重威胁着整个对虾养殖产业的发展。EHP可引起养殖对虾肝胰腺微孢子虫病(HPM)，主要病征为对虾生长迟缓、大小规格不齐，通常要经过2 ~ 3个月饲养才呈现明显的症状，常给养殖户造成巨大的经济损失［7］。

从2004年首次发现至今，对虾肝肠胞虫(EHP)已在全球范围内传播开来。中国、印度、越南、印度尼西亚、马来西亚、委内瑞拉等多个国家已有EHP感染的报道［8］。在我国，广东、浙江、天津、河北、辽宁、江苏等地的养殖对虾中均检测出EHP。浙江省2015年上半年凡纳滨对虾虾苗 EHP携带率为23.1%［9］。2015年辽宁省26个凡纳滨对虾病样中EHP检出率为34.6%[10]。2016 年粤西对虾样品的EHP检出率为41.38%［11］。河北省2017年凡纳滨对虾HPM发病率为3.58%［12］。天津市2015 年~2017年养殖对虾及饵料生物样品中EHP的逐年检出率依次为56.96% 、69.52% 、29.28%［13］。

EHP主要感染对虾的肠道表皮及肝胰腺，富集于肝胰腺小管上皮细胞。感染特点是病变组织肿大，在肝胰腺小管上皮细胞的细胞质内存在着嗜碱性包涵体。与其营胞内寄生生活相适应的，EHP丢失了糖酵解功能，能直接从宿主细胞获得能量。EHP的传播途径有两种：一种是垂直传播，即通过亲虾传播给子代；另一种是水平传播，经口摄食寄生EHP的鲜活饵料、病虾、死虾或环境中的孢子体而感染[14]。通过肌肉注射、口服、与 EHP阳性虾同池饲养等途径，对健康虾进行EHP感染试验[15]，发现该寄生虫具有非常强的传染性，可通过多途径传播，能在虾的消化器官细胞内大量繁殖，吸收营养，从而影响肝胰腺和肠道的正常消化吸收功能，使被寄生的虾类生长发育受阻碍，严重时可导致其生长停止[16]。对虾感染 EHP 后不表现出明显的疾病症状，摄食正常，肠胃充满食物，不出现大批死亡，严重时肠道发炎，肝胰腺萎缩、发软，颜色变深，个别病虾可排白便。发病对虾生长速度缓慢或停滞，但个体差异大，50%~60% 的对虾体重停滞在4~5 g，直至养殖周期结束[17]。

目前关于EHP的研究方法，可以分为组织学方法和分子生物学方法。组织学方法是通过组织切片，HE染色，再进行显微观察，揭示疾病引起的组织病理变化及器官损伤机制的方法。但这种方法方法检验耗时长，操作繁琐，当病原含量低或处于潜伏期时，容易漏诊或误诊，因此需结合分子生物学方法做出明确诊断。目前国内外已有很多分子生物学方法用于检测EHP，主要有原位杂交技术、套氏PCR以及Taqman荧光定量PCR。Tang 等[18] 采用原位杂交方法，特异性检出对虾组织、粪便和养殖水体中的 EHP。雷燕等[19] 根据GenBank中对虾肠道上皮细胞的EHP基因保守序列，设计合成一对特异性引物，优化PCR扩增条件，建立了EHP PCR方法。最低可检测出约100 fg的 EHP 基因组 DNA，可用于EHP感染初期或处于潜伏期幼虾、亲虾，以及池塘底泥、水质的检测。而Taqman荧光定量PCR，是以虾肝肠胞虫的保守序列为靶序列，利用Primer Premier 5.0和 Primer Express 2.0软件分别设计引物和TaqMan探针，将虾肝肠胞虫目标片段克隆到pMD 19-T载体上构建重组质粒，然后以10倍梯度稀释的重组质粒作为标准品。重复性实验表明，该方法具备较好的特异性、灵敏性是对 EHP 标准质粒的检测灵敏度高10倍，可为EHP的快速检测和监测提供参考[20-21]，同时这种方法在实验室使用也比较普遍。

然而“防大于治”，为了EHP感染的风险，主要还是要做好防控措施，在对虾养殖过程中，养殖水体、养殖工具，以及饲喂鲜活饵料等环境因素的严格把关，对控制对虾EHP感染极为重要[16]。应该要加强苗种检疫，选择不带病原的苗种。养殖户在购苗时应主动抽样，委托具有资质的检测机构检验，采购检验合格的苗种。其次，对于曾经发生过对虾生长缓慢的养殖池塘，应采集有代表性的底泥进行检测，对于EHP阳性的底质必须进行严格的清塘灭孢。车间水泥池也应彻底消毒，清洗干净，晾干。进排水系统也要合理设置，对于浮水井或外海水，需经砂滤、蓄水池沉淀、曝气、消毒等处理后方可使用；池塘排换的养殖尾水，需经无害化处理后再排放，防止病原在不同养殖池塘或养殖场间传播。

近年来，EHP的流行和传播对我国对虾养殖业的发展造成了严重影响，已成为导致对虾生长缓慢的主要病原。虾急性肝胰腺坏死/ 虾早死综合症（AHPND/EMS）、虾肝肠胞虫病等新发疫病的发生，更加重了养殖企业的风险和负担，使得我国对虾养殖成功率逐年下降，严重影响了对虾进出口贸易和对虾养殖产业的发展。尽快建立病害生物防控关键技术标准，加强对虾养殖环境保护，繁育SPF对虾苗种，改进EHP检测技术，实时监控疫情，可以减少养殖过程中的损失，同时提高虾苗质量，有效保障对虾养殖的健康发展。

资料编号：[671013]

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