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1.研究目的及意义
煤炭、石油、天然气作为人类的主要能源和有机化工原料,由于是不可再生的矿产资源,并且这些矿产燃烧后排放的大量CO2、SOx、NOx等,这是造成当地污染、酸雨发生和温室气体等环境危机的原因。因此,为了消除污染,实现可持续发展,新能源和清洁化工原料的选择自然是绿色化学的研究内容。从绿色化学的角度看,清洁能源应该是丰富的,最好是可再生的,作为未来人们可以长期依赖的资源和能源,而且它们的使用不应该造成污染。因此,植物生物质资源成为了人类未来的理想选择。
木质纤维素主要由纤维素、半纤维素和木质素组成,是世界上最丰富的碳水化合物资源。各成分的比例因材料种类和来源不同而不同。木质纤维素原料通过物理法、化学法、物理-化学组合法和生物法等预处理方法,水解成葡萄糖、木糖、阿拉伯糖等可发酵单糖,然后发酵生产乙醇、石油等液体燃料,以及多元醇、乳酸、柠檬酸、葡萄糖酸、氨基酸等生物基化学品。
P. putida KT2440能利用的单糖种类相对匮乏,尤其是关于P. putida KT2440利用半乳糖的研究很少。半乳糖是许多半纤维素中含量第二丰富的糖,在植物生物量中占总糖的比例高达3%。本实验室前期已经发现P. putida KT2440可以通过周质葡萄糖脱氢酶将半乳糖氧化为半乳糖酸。
本论文旨在通过外源添加来自Escherichia coli BL21和Pseudomonas rhodesiae NL2019的半乳糖酸代谢途径dgo基因簇最终实现P. putida KT2440对半乳糖的高效利用。
2.国内外同类研究概况
2.1.假单胞菌
2.1.1假单胞菌简介
假单胞菌属隶属于假单胞菌科,分为两大类。第一类有6个组,包括丁香假单胞菌,绿针假单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、铜绿假单胞菌、施氏假单胞菌;第二大类为穿孔假单胞菌。而本实验研究恶臭假单胞菌。
假单胞菌为革兰氏阴性菌,细胞呈单个,多为直或弯的杆菌,单鞭毛或多鞭毛,不产生鞘或突起物,广泛分布于土壤、淡水、海水以及生物体等中。其生长温度范围较广,可在4至43℃生长,大多数菌的最适温度在30℃左右,生长的pH范围在pH7.0至8.5[1]。
2.1.2假单胞菌应用
2.1.2.1假单胞菌与环境生物修复
环境生物修复是利用生物降解环境中的有毒有害物质。与传统的物理、化学方法相比,环境生物修复具有投资少、环境友好、无二次污染、公众可接受等优点,在世界范围内越来越被人们接受。
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