凝结芽孢杆菌酚酸脱羧酶的体内过表达
- 研究目的及意义
酚酸脱羧酶是一种非氧化脱羧酶,能够以对香豆酸、阿魏酸、咖啡酸以及芥子酸等酚酸做为底物,催化进行非氧化脱羧反应,生成对应的4-乙烯基化合物。这一途径对于菌株利用及降解酚酸,解除酚酸对细菌细胞的毒性有重要的作用。
本实验前期以凝结芽孢杆菌NL01为研究对象,以玉米秸秆预处理液为原料,利用等离子体诱变及菌种进行长期适应性进化获得了一株耐稀酸水洗液的高抗逆菌株CC17-40。转录组结果显示,在高抑制物含量水解液中,细菌体内酚酸脱羧酶基因表达量显著上升。因此本文拟以高抗逆菌株CC17-40基因组为模板,钓取菌株体内的酚酸脱羧酶基因,并以凝结芽孢杆菌遗传操作技术为手段,实现酚酸脱羧酶基因在凝结芽孢杆菌体内的过表达,以验证酚酸脱羧酶对菌株耐受抑制物能力的影响。
- 文献综述
2.1木质纤维原料预处理及现状
2.1.1 生物质预处理会水解液中抑制物及其来源
木质纤维原料经过预处理后,所得水解液中一般含有抑制物。根据预处理的方式及原料的性质,抑制物一般分为三类[1]。
(1)酚类化合物:主要来自木质素的降解,主要包括酚醛及酚酸类化合物。如香草醛、对香豆酸等。
(2)呋喃类化合物:主要来自于碳水化合物糖类等在预处理过程中的脱水反应。其主要的代表物是糠醛和羟甲基糠醛。
(3)有机弱酸:主要包括甲酸、乙酸和乙酰丙酸等。其中乙酸来自于半纤维素的脱乙酰反应,常具有较高含量。
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