- 研究背景
自20世纪80年代初,许多国家对献血者进行ALT活性检测,作为筛查非甲非乙型肝炎的替代试验,并一直是血站筛查献血者的必检指标,我国也将ALT列为血液筛查献血者的必检项目之一。ALT升高并非肝炎诊断的特异性指标,许多因素都可以引起ALT升高,如服用某些药物、剧烈活动、体育锻炼、休息不好、饮酒及某些饮食等诸多因素也可导致ALT升高。同时,血液样本的处理、保存、操作和质量控制等都可以影响其检测值。目前大多数血站在献血前用干式生化仪进行ALT快速初筛,使无偿献血报废率明显下降。血液储存着大量人体的信息,所以很多疾病都需要通过验血来进行诊断。血红蛋白是人体内负责为人体活动运载氧气的一种蛋白质,是使血液呈红色的蛋白,也是血细胞的最重要成分。血红蛋白中的铁在二价状态时,可与氧呈可逆性结合。在非正常原因下,亚铁会被氧化为三价状态,血红蛋白会转变为不具有载氧能力的高铁血红蛋白。
传统光学方法是利用血红蛋白的在可见光范围内特定波长的吸收光谱,以及高铁血红蛋白的颜色特性进行检测的。氰化高铁血红蛋白的检测方法是将全血样品经过稀释溶血液处理,将亚铁的血红蛋白氧化为高铁血红蛋白,和氰离子结合为稳定的氰化高铁血红蛋白络合物,而其可以在540m处检测到明显的吸收峰。Hemocue公司和艾康公司生产的便携式血红蛋白分析仪,利用的是光反射原理,检测血红蛋白和化学物质的络合物的反射光强,从而确定血红蛋白的浓度,虽然小巧便携,但容易受到强光环境的干扰,裸露的探测头容易受到污染而造成测量结果的偏离于真实值。因此,就需要一些特定的化学物质使血红蛋白转氨酶显色、稳定、增色来控制变异系数,提高检测的准确度。
水溶性高分子化合物可提高稳定性,即具有所谓“胶体保护”作用。这一方面是由于亲水性胶体易于将疏水性胶体粒子包围起来而发挥保护作用;另一方面是因为水浴性高分子化合物的增粘作用,导致体系塑变值的改变而起稳定作用。借助于水溶性高分子化合物的增粘作用,使胶体溶液稳定性得到改善。悬浮液的稳定性与水溶性高分子化合物的塑变值具有更为密切的依赖关系。水溶性高分子化合物的胶体保护作用,可以从基于化学结构的表面化学作用和流变学特性加以考虑。很多水溶性高分子化合物可应用于分散体系,以使之稳定化。例如,黃蓍胶粉、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇、羧基乙烯聚合物等常被加入乳液类化妆品或含有无机粉末的化妆打底用品之类的美容化妆品中。应当注意的是,水溶性高分子化合物,随着条件的变化,有时会表现出与分散稳定效果相反的聚集作用。
水溶性高分子化合物由于具有增粘、增稠作用,可使分散体系达到稳定化的效果。水溶性高分子化合物水溶液当水分散失以后,由于高分子化合物分子间的相互作用,生成网状结构的薄膜。随化合物种奖的不同,膜的性质也有所不同,这是水溶性高分子物质的重要性能之一。一般来说,水溶性高分子化合物具有一定的吸湿、保湿功能。聚乙二醇(PEG)、羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)等水溶性高分子化合物,由于具有亲水基,与水作用形成氢键而显示出一定的保湿作用。对于PEG来说,主要是其本身具有从空气中吸收水分而在化妆品中表现出保湿功能;而PVA除本身具有一定程度的保湿作用外,主要是有形成薄膜的性能,可以使血红蛋白颜色扩散得更均匀。
- 研究目的和意义
血红蛋白的检测大多是基于光学原理,光源不稳定,易被污染,易受环境干扰。本课题对能使血红蛋白转氨酶显色、稳定、增色的有机化合物进行研究。以血红蛋白为研究对象,比较不同有机化合物对血红蛋白稳定性及显色的影响。找到几种合适的显色、增色、稳定剂,解决实际检测过程中变异系数较大的问题。显色、增色、稳定剂主要依靠机械能作用,包括冲击和剪切力,使血红蛋白复合物的团聚态被打碎成较小的微粒,成为分散状态;并用于保持分散状态的稳定,阻止失控的絮凝,促使悬浮液获得稳定状态,尤其是高分子化合物起了很大的稳定作用。研究显色、增色、稳定剂对特定生化反应的影响,可以提高干化学检测ALT活性结果的可靠性。
三、 实验内容
对能使血红蛋白转氨酶显色、稳定、增色的有机化合物进行研究,利用干片式快速检测仪对血红蛋白复合物进行快速检测,对生成的数据分析,挑选出变异系数在合理范围内的尽量小的一种或几种最佳化合物。
四、 拟解决问题
本课题拟解决的关键问题如下:
- 解决在膜上能使血红蛋白转氨酶稳定、颜色分散并分布均匀
- 解决在膜上血红蛋白能够反应完全、稳定
- 控制变异系数尽量要小
- 实验进度安排
2021.2-2021.3了解课题内容,查阅相关文献
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