曲霉菌中半乳甘露聚糖(GM)的分离纯化文献综述

 2023-02-07 15:09:24

一. 选题背景及意义

研究表明,免疫力较差的机体易引起侵袭性真菌病发生。肾上腺皮质激素,免疫抑制药物在临床中被广泛应用,同时由于器官移植等因素影响,导致侵袭性真菌病患者发病率呈上升趋势,而实施有效的检测方式,对患者预后有较大影响。

常见的真菌比细菌大几倍甚至几十倍,结果比细菌复杂得多,细胞壁厚得多,占干重的30%以上,真菌细胞壁缺乏黏肽,由结构不同的多糖组成,部分还有蛋白质及类脂体组成。半乳甘露聚糖抗原主要存在于曲霉菌属的菌丝及孢子中,在酸,盐环境下有极好的耐受性,在水中溶解度非常大,可形成透明溶液液,GM抗原是一种以甘露聚糖为主链,以呋喃半乳糖为侧链的多糖。根据不同的 GM 抗原中甘露聚糖与呋喃半乳糖的比例不同,从不同植物或真菌提取的抗原有很多不同的应用。提取自豆类等植物中的半乳甘露聚糖具有很低的热量,常被用于食品行业生产中作为黏稠剂和稳定剂使用,而且半乳甘露聚糖还具有很多生理功能,广泛应用于医药和美容中。在烟曲霉整个生产周期中,GM 抗原最早在稳定期出现,从菌丝端进行释放,GM 抗原也是最早释放的曲霉菌的抗原,而 GM抗原也是烟曲霉菌细胞壁独有的组成部分,它还是一种致病性抗原,GM的释放量与菌量成正比,可以反映感染的严重程度,常作为临床检测和诊断的标志物。对半乳甘露聚糖的检测在侵袭性真菌病中有较大价值,早期快速诊断有助于及时实施抗真菌治疗,控制病情。

二.对选题的了解和准备程度

(一)相关文献综述

通过文献得知从烟曲霉中获取半乳甘露聚糖有如下方法:烟曲霉分泌到胞外的半乳甘露聚糖抗原为一种多糖,一般从该菌的培养液中得到。从培养液中获得半乳甘露聚糖主要为粗提物,文献中记载为用4倍体积无水乙醇沉淀培养液上清,再用75%乙醇洗涤3次,获得烟曲霉分泌性抗原粗提物,也有记载利用3倍乙醇沉淀后离心获得抗原粗提物,在100℃下用1.5mol亚硝酸处理2小时,经0.45mu;m薄膜过滤所得滤液即为半乳甘露聚糖纯品。或利用无水肼处理,利用无水乙醇沉淀,再用无水乙醇洗涤,自来水透析,再用亚硝酸处理,乙醇沉淀,乙醇洗涤,冻干,反复操作,最后将处理得到的物质用MonoQ柱层析纯化,最终得到半乳甘露聚糖纯品。

(二)准备解决的问题

本实验准备根据文献记载的方法为基础,对其存在的优缺点进行分析和研究,在此基础上总结出适合本实验室的实验方案。

(三)研究的目标和内容

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