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文献综述
1.1 研究背景人乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMO)是母乳中非常独特的一类寡糖,大多由3~6 个糖基组成,迄今已发现200多种。
其中,2-FL是含量最多的一种HMO,可占母乳中HMO含量的30% 。
动物性乳液则不含此类物质。
HMO对婴幼儿的健康与发育起到关键作用,在出生后的4~6 个月内如没有摄入或仅摄入少量母乳会增加患肠胃炎、急性中耳炎及免疫系统疾病的风险,长大后容易超重或发展成为Ⅱ型糖尿病,且智力水平可能低于母乳喂养婴幼儿 [1-4] 。
果聚糖和半乳糖寡糖作为 HMOs 的替代品被广泛添加在婴儿配方奶粉中,然而,它们的结构和 HMOs 相差较远, 其对健康的促进作用也尚不明确[5-8]。
2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)是母乳中重要的寡糖之一,能够有效增强婴幼儿对肠道疾病的抵抗力,是极具潜力的婴幼儿用食品添加剂。
在欧洲2'-FL已通过巴斯夫等公司生产并添加在奶粉中进行销售,预计我国在5年内将开放2'-FL的商品市场,届时会带来巨大的经济利益 [9-11]。
1.2 2-FL的来源2-FL的最早生物合成是通过酶催化来实现,Albermann等 [12]在2000年通过外源表达和纯化 Escherichia coli K12来源的Gmd 酶 (GDP-D-甘露糖-4,6-脱水酶)和 WcaG 酶 (GDP-4-酮-6-脱氧-D-甘露糖-3,5-差向异构酶-4-还原酶),在体外将GDP-D-甘露糖转化为 GDP-L-岩藻糖,即2-FL合成最关键的前体。
后来Albermann等人[14]进一步表达了幽门螺杆菌来源的 FucT2 酶,并与Gmd和WcaG联用,以GDP-D-甘露糖为出发底物,乳糖为最终底物,在体外成功合成了2-FL。
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