羰基还原酶的大肠杆菌工程菌的构建文献综述

 2021-09-25 20:41:35

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毕业设计(论文)开题报告学生姓名: 邓叔明 学 号:3801110218所在学院:食品与轻工学院 专业:食品科学与工程 设计(论文)题目:羰基还原酶的大肠杆菌工程菌的构建指导教师:江凌 副教授2015 年1月 23 日毕 业 设 计(论 文)开 题 报 告文 献 综 述1羰基还原酶  羰基还原酶,是一种具有高度的化学 、区域和立体选择性的生物催化剂,常用于生物转化合成具有光学活性的不同种类的手性化合物[1-2]。

手性醇是一种重要的手性模块化合物,如光学纯苯基乙二醇是液晶材料中不可缺少的手性添加剂,也是制备具有光学活性的医药 、农药和功能材料的重要中间体[3-4]。

尽管研究者也试图通过构建基因工程菌来增加目标蛋白的表达量以促进转化反应,但是效果不显著 。

本研究从大肠杆菌酵母的基因组出发,采用分子克隆技术分离出一段新型的羰基还原酶基因,以该基因构建组大肠杆菌为生物催化剂。

1.1 羰基还原酶生物催化的原理生物催化羰基化合物的不对称还原主要是在醇脱氢酶和其他氧化还原酶作用下进行的。

微生物产生的能够还原羰基化合物的酶主要属于醛酮还原酶系[5],醛酮还原酶系中的大部分酶都可以代谢大量底物。

反应由还原型辅酶 NAD(P)H提供氢,在氧化还原酶的作用下从 re或 si面进攻羰基生成相应的单一对映体,同时辅酶被转化成氧化型 NAD(P) 。

反应机理如图 1所示E1和 E2酶从 si面进攻而 E3和 E4酶从 re面进攻,理论上可以得到 4种立体结构[ 6]。

为了使反应一直进行下去,需要不断地补充还原型辅酶 NAD(P)H或利用辅酶再生系统来补充还原型辅酶NAD(P)H。

常见的例子有:假单胞菌和乳酸杆菌醇脱氢酶属于酶 E1,白地霉甘油脱氢酶和毛霉菌二羟基丙酮还原酶属于酶 E2,而酵母和马肝醇脱氢酶属于酶 E3。

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