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一、固定化酶概述酶催化具有效率高、选择性强、反应条件温和等优点,现已广泛应用于医药、食品、精细化妆品领域,但游离酶一旦离开细胞环境后稳定性迅速下降,且不能重复使用,使其在工业生产中的应用受到限制。
[1]酶固定化是将酶与固相载体结合,将游离态的酶分子束缚于载体中,这样不仅有利于稳定酶的催化构象,提高酶的稳定性,同时还有利于酶制剂的回收和产物分离,大大降低了酶制剂成本[2]。
固定化酶的制备方法很多,大致可分为吸附法、包埋法、化学交联法和共价结合法。
[3]尽管目前固定化酶种类繁多,但其结构的大致分为两部分,一是催化部分:酶,这部分是催化的关键,酶分子活性高低直接决定了固定化酶的催化效率。
[4]二是非催化部分:载体,这部分并没有催化活性,其作用是结合酶分子,使其便于操作和回收,载体的孔结构、比表面积和活性位点密度决定了酶的装载量。
近年来,新型的酶固定化载体不断涌现。
依据材质的不同可分为有机高分子聚合物、无机金属氧化物和金属有机复合材料,[5]这些载体表面活性高,且具有介孔尺度的孔结构和巨大的比表面积,可容纳较多的客体分子。
现有涉及酶固定化载体的研究大多集中在如何提高载体的装载量,但却忽略了一个重要的问题即载体表面化学性质将对酶构象产生巨大影响。
根据固定化酶的结构可知,酶分子结合于载体上,实际上是处于固相载体和液相主体之间,其结构不仅受液相主体的影响,同时也与固相载体表面的化学性质密切相关,但现有的研究鲜有对这一问题进行系统的阐述。
因此,为了讨论固相载体表面化学性质对酶催化构象及活性的影响,必须首先构建一系列具有不同表面化学性质的酶固定化载体。
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