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一、研究背景及意义随着鸟氨酸的生物和医学功效被越来越多得发掘,对鸟氨酸的需求也在快速增长。
现在生产鸟氨酸主要分为化学的合成方法、酶法和代谢工程,化学合成这种方法效率低同时需要的条件也比较苛刻,原料的成本也比较高所以我们不选用化学合成,酶法生产鸟氨酸的应用要要早于代谢工程,酶法的反应条件温和、催化效率高。
但是存在菌株筛选困难,存在底物抑制、分解路径和其他合成路径的竞争的一些会降低酶法产率的情况。
相比于酶法代谢工程就存在一定优势,在构建好质粒(应用Crispr敲除方法将质粒上的不需要的基因给敲除掉同时导入目的基因)后可以导入目的菌株,而目的菌株我们选择的是解淀粉芽孢杆菌,解淀粉芽孢杆菌的获得比较简单而且是对人体无害的菌,它可以产生谷氨酸,而谷氨酸正好是我们合成鸟氨酸所需要的底物。
代谢工程比起酶法可以让我们需要的基因在我们选定的菌株中表达这样就比筛选菌株所需时间短,同时敲除基因后分解路径和其他合成路径的竞争就没有了,这样可以大大提高鸟氨酸的产率。
本实验就是应用代谢工程改造解淀粉芽孢杆菌高效合成鸟氨酸。
二、鸟氨酸生产的现状2.1 鸟氨酸概况鸟氨酸[1](ornithine)(H2NCH2CH2CH2CH(NH2)COOH),是一种碱性氨基酸。
虽在蛋白质中不能找到,但存在于短杆菌酪肽、短杆菌肽S等的抗菌性肽中,另外从深山紫堇根中发现了δ-N-乙酰鸟氨酸,同时鸟氨酸是由精氨酸为碱或精氨酸酶作用分解生成,它是瓜氨酸、脯氨酸和谷氨酸的前体。
此外鸟氨酸是一种非必须氨基酸。
在生物体内,鸟氨酸主要参与尿酸循环,对于体内氨态氮的排出有重要作用。
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