果蔬采后主要病害Penicillium expansum体内、体外生长动力学分析
一、扩展青霉简介
扩展青霉(Penicillium expansum),是果蔬采后主要病原菌之一, 在环境中广泛存在, 通过土壤、作物残骸、载具、污水等方式接触果实,一旦侵染果实伤口即可迅速发病。 不仅导致果实的腐烂,如引发柑橘青霉病、苹果青霉病、甘薯青霉病等,还会产生致癌性毒素棒曲霉素(patulin),降低果实的保存时间和商品价值, 给果蔬产业带来极大的损害。扩展青霉属于嗜冷性真菌,孢子抗逆性强,耐低温;而过量使用杀菌剂将导致抗性菌株的产生以及化学物质的残留, 甚至导致扩展青霉次级代谢的提高,引起毒素积累;同时生防菌成本昂贵,受环境条件影响较大。 针对扩展青霉发展新的贮藏保鲜方法及策略是非常必要的。
棒曲霉素(patulin) 是由多种真菌产生的次级代谢产物,其产生菌有青霉属( Penicillium) 、曲霉属( As-pergillus) 和 丝 衣 霉 属 ( Byssochlamys ) 。 扩 展 青 霉(P. expansum) 是产展青霉素的主要菌种,能够侵染果蔬使其发生腐烂。展青霉素能引发一系列急性、慢性疾病以及细胞水平的病变,具有致畸性、致癌性和免疫毒性。该毒素在果蔬食品生产中污染相当普遍。已经在多个国家发现展青霉素污染,许多国家针对展青霉素制定了相关法规,例如,欧盟规定食品中展青霉素的最大限量为 50 mu;g /kg,婴儿食品中要求更高,规定其展青霉素的最大限量为 10 mu;g /kg。
二、国内外研究现状综述
我国是果蔬种植和出口的大国,然而采摘后病害的侵染造成果实腐烂严重,给果蔬种植业及副产品加工行业带来巨大的经济损失。目前控制扩展青霉的主要方式仍是以化学杀菌剂和冷藏等物理手段为主,化学杀菌剂虽然能够有效控制病原菌扩展青霉的生长,但是随着病原菌抗药性能和人们健康环保意识的不断增强,化学防治方法已逐渐不被人们认可甚至有些杀菌剂因存在毒性风险而已被禁止使用。诸如冷藏等物理方法虽然一定程度上可以阻止病原菌的生长但容易影响果蔬的风味和营养价值,且会造成冻害,此外,处理成本也相对较高。青霉病是果蔬采摘后致其腐烂的重要病害之一,因此该病的有效防治成为果蔬产业亟待解决的问题。
三、研究方法及技术路线
1、菌株及主要试剂
实验所用病原菌P. expansum从自然发病的苹果中分离得到。PCR所需试剂购自日本TAKARA公司,其他主要试剂购自生工生物工程(上海)股份有限公司,DNeasy Plant Mini Kit(Cat. No. 69106)及Gel Extraction Kit(Cat. No. 28706)购自德国Qiagen公司。苹果果实购自当地市场。
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