开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
1课题背景及意义
大枣,系鼠李科枣属的果实,作为一种天然药食同源植物具有较高的营养价值和保健价值。我国是大枣资源最丰富的国家, 现有大枣品种704个, 化学成分复杂,且药理活性广泛, 具有调节免疫、抗肿瘤、抗氧化、修复肝损伤、抗疲劳等作用, 对造血功能以及肠道运动等也有改善作用[1]。随着人们日益重视养生健康产业,抗氧化作用出色的大枣得以广泛的研究和利用, 加以我国枣资源独具特色的生产栽培优势, 具有巨大的发展空间和客观的经济效益,现有开发药品、保健品、食品等120余种。但近年来,对大枣化学成分的研究主要集中在生物碱、皂苷、黄酮、有机酸及糖苷类等成分[1],而对大枣中抗氧化成分之一类胡萝卜素的研究未见报道,缺乏整体评价。
类胡萝卜素是所有光合生物及一些非光合原核生物与真菌合成的亲脂性天然色素,对植物、动物和人都具有广泛的生物学作用 [2] 。类胡萝卜素结构中共轭双键的存在使其具有较强的抗氧化活性[14]。它是一种较为安全,稳定的天然食用色素,具有VA原活性、抗氧化、预防心血管疾病、保护视网膜、增强免疫力等功效,随着对类胡萝卜素需求的日益增加,综合开发利用植物类胡萝卜素已成为迫切需求。
基于此,本次实验旨在筛选一种适用于从大枣中提取分离纯化类胡萝卜素,并鉴定以及研究其抗氧化活性整套方法,深入研究大枣的抗氧化功能成分及其活性测定,对阐明大枣抗氧化作用机制,促进产品开发有理论实践意义,以期为大枣中类胡萝卜素的有效开发应用提供参考。
2文献综述
目前,国内外对于植物类胡萝卜素的功能分析包括纯化鉴定方法已经研究的较全面,如盛冉等[8] 以鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii) UL发酵提取得到的类胡萝卜素粗提液硅胶柱层析纯化后得到组分,经鉴定后结果表明类胡萝卜素粗提液具有抗氧化性,纯化后的类胡萝卜素抗氧化活性显著提高的研究。
与此同时国内外对于大枣的研究只停留在大枣的成分分析,大枣的药理作用,大枣生产加工工艺,例如 Muhammad Noman Khan等[4]通过使用HPLC-QTOF-MS / MS鉴定主要代谢物并使用HPLC-IonTrap-MS / MS分析对八种枣代谢物进行定量分析,该方法表现出极佳的准确性,误差小于3%,将用于鉴定和定量两个物种的水果和整个植物样品及其草药产品中的标记化合物。该研究将在药物发现,这些植物的分类学鉴定以及开发其草药配方的质量控制方案方面提供巨大的实用性。Yoann Birling等[7]对枣仁安神治疗失眠的系统分析研究发现,枣仁安神对睡眠质量的影响(平均差异)优于安慰剂,与苯二氮卓相似,结果表明枣仁安神可治疗失眠。但是,研究方法的欠佳无法为枣仁安神提供强有力的建议。需要高质量设计的临床试验。张源等[5]对大枣的联合使用进行临床疗效研究,通过观察五虎汤合葶苈大枣泻肺汤加减治疗小儿支气管肺炎临床疗效,结果发现五虎汤合葶苈大枣泻肺汤加减治疗小儿支气管肺炎疗效显著,能够明显改善中医证候积分,促进症状体征缓解,并可减轻机体炎性反应,增强免疫功能。关随霞等[6]对大枣加工工艺的研究,通过单因素试验、正交试验确定最优工艺参数,此条件下生产的酸奶,呈乳白色,质地均匀,口感光滑细腻,酸甜适中,有大枣和山药的独特风味,组织状态良好。该产品不仅具有酸奶的营养价值,还含有怀山药、大枣的营养成分,多种矿物质、黏质多糖、黄酮类化合物、皂角类物质及人体所需的多种氨基酸,是一种新型保健乳制品。
我们可以发现对于大枣的研究中缺乏对其所含单体化合物药理活性,作用机制的深层次阐述,特别是对大枣中类胡萝卜素的提取分离纯化与抗氧化能力的研究鲜有报道,我们通过本次实验的进一步研究,填补研究空白,将有助于研发更符合国际标准、更适应市场需求、高科技含量的大枣产品, 充分发挥其安全、稳定、卓著的药效功能, 更好地为人类健康服务[1]。因此我们采用浴式超声辅助提取方案,并用硅胶柱层析分离纯化粗提液中的类胡萝卜素,利用水杨酸法以证明类胡萝卜素的体外抗氧化活性。
3研究方案
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