开题报告内容：
1.背景与设计思路
间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSC）是来源最为丰富的一种多能干细胞，由于其对肿瘤的天然归巢作用，将其作为药物载体可以将药物高效递送至肿瘤组织[1]。但是MSC在体内易分化，具有致瘤的可能[2]；而且其易分化为成纤维细胞，可能会进一步增加肿瘤细胞外基质的致密程度，减少药物的渗入及抗肿瘤作用的发挥；因此限制了其作为药物载体的应用[3]。
由于膜囊泡与自体细胞膜结构相似，因此它作为药物的载体表现出更好的生物相容性和更低的毒性。这种基于细胞膜的药物递送系统生产方式简单，因此，保留的膜结构赋予载体各种生物功能或靶向特异性，无需进一步修饰。
目前分离膜囊泡和细胞膜载药的研究手段已经十分成熟，很多研究人员尝试采用细胞膜作为包被物，载入药物或纳米粒子制成“仿生粒子”，从而实现粒子在体内的长循环，提高载药量或增加药物在肿瘤部位的累积和穿透。
基于此，本课题设想利用MSC细胞膜衍生的膜囊泡作为药物载体，在保留MSC的肿瘤主动靶向功能的基础上，避免MSC的体内致瘤及分化的可能。本课题将探索MSC膜囊泡的制备和载药工艺，并初步对该递药系统的进行体外评价。预计本课题的完成将提供一个新的载体平台。
2.研究内容
国际细胞外囊泡学会（ISEV）出版了细胞外囊泡研究指南（MISEV），详细总结了细胞外囊泡的分离、表征和功能研究的方法[4]。另有大量文献详细阐述了具体的研究实例。在仔细研读相关文献后总结出适用于本课题的研究方法。
2.1囊泡的制备和表征
MSC用含有10%胎牛血清的F12培养基中培养。使用第3代至第8代的细胞用于膜囊泡的制备。细胞在37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养。当细胞相互汇合至80%时，用0.25%胰酶消化分散细胞，以1:3的比例进行细胞传代。
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