紫外分光光度法测定植物中总黄酮、总多酚、总皂苷含量的研究进展
摘要:黄酮,可抗衰老、抗氧化、调节血脂。多酚,可抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、抗氧化。皂苷,具有溶血、降血脂、抗菌、消炎的作用。这三种物质在现代医学中应用越来越广泛。而紫外分光光度法(UV法)在测量含量方面具有操作简便,设备要求低,不需预知所测物质单体成分等多方面的优点。因此目前对于总黄酮、总皂苷、总多酚的物质的含量测定大多都是用紫外分光光度法。本文旨在对目前现有的总黄酮、总皂苷、总多酚的紫外分光光度读法测量方法进行系统的归纳整理,做出综述。
关键词:紫外分光光度法;总黄酮;总多酚;总皂苷;含量测定;显色方法
紫外分光光度法作为极为常用的测量物质含量的定量分析方法,在药物分析中一直有着举足轻重的地位。因为紫外分光光度法测量的是某一波长下的所有物质的吸光度,故其不适合用于具体某个化合物含量的测量。但是由于紫外分光光度法测量的简便性和可操作性,且能测量某类物质的总含量,其仍是测量总黄酮、总多酚、总皂苷等物质总含量的首选方法。因此,本文就目前已报道的使用紫外风光光度法测量总黄酮、总皂苷、总多酚含量的方法进行了归纳、汇总和整理,以作为今后对总黄酮、总多酚、总皂苷的测量作为参考。
1.紫外分光光度读法测定总黄酮的研究进展
黄酮,其基本母核为2-苯基色原酮,具有增强免疫力、延缓衰老、改善记忆、促进生长发育、抗疲劳、减肥、抗辐射、调节血脂等作用。目前测定植物提取物中黄酮类化合物的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)和分光光度法。采用HPLC法测定总黄酮含量干扰少,误差小,结果较为准确,但该法对样品纯度的要求很高,前处理较复杂。需预先知道提取物中黄酮的主要单体成分,并以这些成分的单体标准品为对照,进行测量。分光光度法操作简便,不需预先知道提取物中黄酮的单体成分,对设备要求低。故现在黄酮含量的测量大多均使用UV法。由于大多数黄酮提取物中均含有对分光光度法测量产生干扰的物质,从而导致该法测量实验误差较大,但可以通过预处理措施,消除干扰因素,使测量结果较为准确。
1.1 AlCl3显色法和Al(NO3)3络合法
Al(NO3)3络合法是基于邻二酚羟基的反应,并非黄酮类化合物的专属反应。因此,具有邻二酚羟基的其他化合物也可以发生此反应。而酚羟基在间位、对位时无此反应,邻三酚羟基由于位阻也无此反应。因此,未知黄酮类成分和有共存邻二酚羟基干扰组分时不能采用此法。而若使用AlCl3显色法,由于黄酮类化合物和氯化铝反应后,由于所测黄酮所含羟基的位置是3-OH、5-OH还是邻二酚羟基,以及配位位置数量的不同,反应产物的最大吸收波长会有较大差异,因此需使用所含黄酮作对照品,测定反应产物的具体最大吸收波长后,再进行含量测定。
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