1.内容和意义 1.1内容 1.1.1 翠雀属 翠雀属植物毛茛科,分布于北温带,全世界约350种,我国约有173种[1]。其中24种作为药用,具有镇痛、镇静,祛风湿,治疗跌打损伤,止咳平喘,解热等功效[2],使用该属植物作为杀虫剂也有百年历史[3]。二萜生物碱不仅是该类植物的有效成分和毒性成分[4],而且也被认为是它们的特征化学成分[5]。 1.1.2 还亮草 还亮草是毛茛科,翠雀属多年生草本植物。分布于中国广东、广西、贵州、湖南、江西、福建、浙江、江苏、安徽、河南、山西南部。生海拔200-1200米间丘陵或低山的山坡草丛或溪边草地。全草药用,有祛风、理湿、解毒、止痛作用,用于中风半身不遂,风湿筋骨疼痛,外用治痈疮[6]。还亮草(Delphinium anthriscifolium Hance)是毛莨科(Ranunculaceae)翠雀属(Delphinium)还亮组植物,同组的还有卵瓣还亮草(Delphinium anthriscifolium var.savatier)、还亮草(原变种)(Delphinium anthriscifolium var.anthriscifolium)以及大花还亮草(Delphinium anthriscifolium var.majus)三种植物,该组植物数量少,化学成分也未见较多研究。 1.1.3主要实验内容 采用酸溶碱沉的方法对还亮草进行总生物碱的提取,利用柱层析和高效液相色谱对总生物碱进行分离纯化,得到多个单体化合物,最后利用氢核核磁共振谱、碳核核磁共振谱、二维核磁共振谱、质谱和红外光谱对这些单体化合物进行结构鉴定。 1.2意义 1.2.1寻找新的二萜类生物碱 天然药物在人类防治疾病的过程中一直发挥着重要的作用,吗啡、青霉素、链霉素以及紫杉醇等源于自然的单体药物都极大的改变了人类的生存状态与生活质量。研究发现由天然产物开发得到的药物中,生物碱约占二分之一,这是其他结构类型不可比拟的[7-9]。二萜类生物碱为源于四环二萜或五环二萜的氨基化而形成的beta;-氨基乙醇、甲胺或者乙胺氮原子的杂环化合物,作为生物碱中结构最为复杂的一类化合物,在药理上也表现出多样性,对药物或者先导化合物的研发具有重要意义[10]。选择还亮草作为研究对象,通过本项研究希望得到新的二萜类生物碱,并对其进行生物活性评价,希望可以找到新的镇痛活性成分,为之后的临床提供新的选择。通过实验过程中的结构测定,可以丰富二萜类生物碱的结构研究。 1.2.2丰富植物化学分类学的内容 一般认为,植物亲缘相近的种,在外形上相似,其所含的化学成分也较为相近,特征性化学成分的存在可以从本质上反映植物的亲缘关系。完全基于植物外形特征的植物分类学方法存在缺陷,在一些情况下并不能真实反映其亲缘关系。因此通过总结特征性化学成分的规律,从化学角度阐述植物之间的亲缘关系,从而对以形态特征为分类依据的植物分类形成有益大的补充,具有非常重要的意义[11]。由于还亮草组的植物较少,化学成分也尚未深入研究,希望可以通过本项研究来丰富植物化学分类学的内容。 2.与课题相关的文献综述 另附在开题报告之后 3.研究方案与技术路线 3.1研究方案 采集还亮草草药,自然阴干后粉碎,并用95%乙醇提取得到还亮草总浸膏。再用3%酒石酸溶液与还亮草总浸膏混悬,过滤得到酸水不溶物和酸水提取物。酸水提取物先用乙酸乙酯萃取,得到乙酸乙酯部位。剩下的酸水部分,用碳酸钠调节PH值至9-10,并用氯仿萃取,得到氯仿部位,之后再用正丁醇萃取,得到正丁醇部位。将乙酸乙酯部位、氯仿部位、正丁醇部位浓缩转移,分别得到乙酸乙酯部位、氯仿部位、正丁醇部位浸膏。通过文献调研可知,生物碱的极性较小,主要分布在氯仿部位。 对氯仿部位总浸膏,通过正、反向硅胶柱层析柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、高效液相色谱以及重结晶等分离技术,对其进行分离纯化,对分离得到的化合物采用1D和2D NMR、UPLC-MS、IR、X-ray等分析技术进行表征,从而确定化合物结构。 3.2技术路线
4.研究进度 2020/3/1-2020/3/31 完成文献综述 2020/4/1-2020/5/31 完成实验 2020/6/1-2020/6/10 完成毕业设计撰写及答辩 5.特色与创新 选择还亮草一方面其化学成分尚未深入研究,并且还亮草中二萜类生物碱为其特征化合物[6],希望通过该研究得到新的二萜类生物碱,丰富二萜类生物碱结构的研究;另一方面,还亮草属于草本植物,植株小且根系不发达,采集困难,还亮草可能属于过渡类群,但是对于还亮草组植物的植物的化学成分研究还不充分,对该组植物的归类还不能下结论。希望通过本实验研究,可以丰富植物化学分类的内容。 学生签名: 年 月 日 |
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指导教师意见: 指导教师签名: 年 月 日 |
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所在教研室审查意见:
负责人签名: 年 月 日 |
填写说明
1.指导教师意见填写对文献综述的评语,对本课题的深度、广度及工作量的意见和对论文结果的预测;
2.所在教研室审查意见包括对指导教师意见的认定和是否同意开题等。
参考文献:
1. 容路生, et al., 朝鲜淫羊藿生物学特性及适生区生态特征. 特产研究, 2021. 43(01): p. 44-48.
2. 李伟业 and 于华忠, 三叶木通研究进展. 现代农业科技, 2021(01): p. 70-72.
3. 李晓宁, et al., 紫杉醇构效关系研究进展. 天然产物研究与开发, 2009. 21(03): p. 535-544.
4. Lin, C.Z., et al., Diterpenoid alkaloids and flavonoids from Delphinium trichophorum. Phytochemistry, 2014. 97: p. 88-95.
5. 王锋鹏, 乌头属和翠雀属植物中生物碱化学研究概况. 药学学报, 1981(12): p. 943-959.
6. 何隽, et al., 大花还亮草中的黄酮类化合物. 中南民族大学学报(自然科学版), 2018. 37(02): p. 60-62 73.
7. Chao-Zhan, L.I.N., et al., A new diterpenoid alkaloid isolated from Delphinium caeruleum. Chinese Journal of Natural Medicines, 2017. 15(01): p. 45-48.
8. 梁晓霞, 谷地翠雀花中生物碱化学成分的研究. 2007, 四川大学.
9. 闫路平, 弯距翠雀花中化学成分的研究. 2007, 四川大学.
10. 单连海, 四种国产草乌大花还亮草、毛果船苞翠雀花、多根乌头、林地乌头生物碱成分研究. 2017, 西南交通大学.
11. 宋磊, 卵瓣还亮草中生物碱化学成分的研究. 2007, 四川大学.
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