开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、选题背景
恶性肿瘤是现代医学仍未攻关的一类疾病,目前有效的治疗方法主要为化疗。但是化疗药物的多药耐药性(MDR)是化疗的主要治疗挑战。耐药细胞可是通过表达ATP结合盒转运蛋白(ABC转运蛋白) 外排化疗药物,其中一种重要的转运蛋白为P-糖蛋白(P-gp)。前期研究发现肺癌细胞和乳腺癌细胞Pgp高表达引起的耐药与细胞氧化应激平衡有关,增强细胞抗氧化应激能力可逆转耐药。
抗氧化剂胱氨酸、维生素E、维生素C和山奈酚均可以通过消除ROS、提高超氧化物歧化酶的含量和谷胱甘肽含量或其他通路改善氧化应激,逆转P-gp过表达引起的的多药耐药性,增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,促进其凋亡。
二、研究目的
本研究拟考察不同类型抗氧化剂(如胱氨酸、维生素E、维生素C和山奈酚)对细胞内氧化应激平衡、ROS清除及P-gp表达的影响,探索高效逆转耐药方式。
三、实验内容
1.选择肺癌A549/或乳腺癌MCF-7敏感型和耐药型细胞株,待细胞到达生长平台期后12、24h取样,测定培养基和细胞内部ROS水平,P-gp表达及活性。
2. 取0.5、1.0、2.0mM维生素C,待细胞到达生长平台期,加入维生素C,12、24h后取样,测定培养基和细胞内部ROS水平,P-gp表达及活性。
3. 取5、10、20mu;M山奈酚,待细胞到达生长平台期,加入山奈酚,12、24h后取样,测定培养基和细胞内部ROS水平,P-gp表达及活性。
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