摘要:目的:建立LC-MS/MS法,测定大鼠血浆中药物。对国内外大量有代表性的论文进行分析,归纳和整理后表明该技术是一种快速灵敏的定量分析生物样品中微量药物及其代谢产物的有效方法。结论:该法专属性强,灵敏度高,操作简便,适用于对生物样本中药物的研究。
关键词:LC-MS/MS 大鼠血浆中药物
正文:
1.LC-MS/MS的特点
LC-MS/MS采用串联质谱,既能得到分子离子峰,又能得到碎片离子峰。LC-MS/MS技术的关键是在于解决高流量的液相色谱系统和高真空质谱仪器间的矛盾。解决这个问题的关键是接口。API接口包括了ESI和APCI两种电离方式,ESI/MS能直接分析溶液样品,适合于分析极性强,难挥发或热不稳定的化合物,适合于大多数药物及其代谢物的定性和定量分析,但对流动相的选择要求高。APCI/MS适用于分析有一定挥发性的中等极性或低极性的小分子化合物。LC-MS/MS对生物样品的提取,纯化和浓缩等前处理过程没有严格的要求,由于血浆样品试样的提供量比较少,基质复杂,使用LC-MS/MS可以克服背景干扰,提高信噪比。选择反应监测LC-MS/MS可以同时检测具有特征反应的母离子和子离子,结合色谱保留时间,具有高度选择性,大大改善了信噪比。LC-MS/MS具有较高的灵敏度和专属性,不需要使分析物实现完全分离,使样品前处理过程简化,分析测试时间大为缩短,同时具有多通道检测功能,允许同时对多个成分进行定性、定量分析。为复杂的生物机智中的定性定量分析痕量药物及其代谢物提供了可能。
- LC-MS/MS在测定大鼠血浆中药物的应用
LC-MS/MS方法可以用来建立灵敏,快速的生物样品定量分析方法。LC-MS/MS方法的建立要从质谱条件、色谱条件和生物样品预处理等三个方面进行条件的选择和优化。质谱条件的选择主要包括合适的离子源,扫描离子,扫描方式分辨率,气体流速等方面。色谱条件的选择主要包括流动相,流速及色谱柱等几个方面,有时候需要选择合适的梯度洗脱。生物样品预处理的方法包括:稀释后直接进样,沉淀蛋白后进样,固相萃取,液液萃取等。分析方法建立后要进行严格的方法确证,方法应该要满足灵敏度高,选择性强,线性范围宽,准确度和精密度良好,避免离子抑制等要求。
3.LC-MS/MS未来的发展
LC-MS/MS能够提供高的灵敏度和鉴别代谢物的能力,能减少分析方法开发、样品预处理和分析所用的时间,可以同时分析多个组分,实现生物样品中药物的高通量分析。运用LC-MS/MS方法能够避免复杂繁琐的分离、纯化代谢物的过程,可以分离鉴别难辨识的痕量代谢产物。LC-MS/MS越来越受到人们的重视,在生命科学、医学等领域都受到了广泛的应用。
参考文献:
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