一.研究的问题:
研究远志不同炮制品对东莨菪碱致小鼠痴呆模型学习记忆的影响。
二.采用的研究手段:
采用腹腔注射氢溴酸东莨菪碱的方法制备小鼠痴呆模型,灌胃给予远志的不同炮制品,采用Morris水迷宫评价远志不同炮制品对小鼠认知能力的影响,同时测定小鼠大脑皮层和海马区乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性。
三.文献综述:
阿尔茨海默病(Alzheimerrsquo;s disease,AD)是一种病因不明确、发病机制繁杂的慢性进行性、原发性脑部神经退行性疾病,主要临床表现有记忆力、分析判断、认知功能障碍、情绪及行为异常等。主要的病理改变为细胞外淀粉样蛋白沉淀形成老年斑、神经元纤维缠结以及广泛神经元突触的缺失、炎症、氧化甚至是坏死[1]。主要发生在与记忆及学习功能相关的前脑基底、海马和大脑皮质等部位。AD是痴呆中最常见的一种,全球发病率高,大约占据了痴呆疾病中的2/3。目前,尚无有效的治疗方法,因此建立理想及可靠的AD动物模型对于探明AD的病因、病理过程以及寻找和筛选有效药物是非常必要的。
东莨菪碱是M受体阻断药,可阻断大脑皮质、隔区及海马结构中的乙酰胆碱受体结合位点,引起胆碱能系统功能障碍[2]文献报道东莨菪碱可引起大鼠皮层AChE活性的升高,以致ACh分解增多,造成脑内ACh含量不足,导致中枢神经系统功能障碍,出现学习记忆和认知能力下降[3]抑制AChE活性的药物可以减少ACh的分解,增加ACh含量,从而增强胆碱能神经系统功能,改善学习记忆,用于老年痴呆的治疗[4]。东莨菪碱所致青年鼠的记忆损害和自然老龄鼠的记忆损害存在相同的机制,且采用东莨菪碱制备痴呆模型具有简便易行、经济有效等优点,故东莨菪碱是抗老年性痴呆药物实验研究中常用的造模药物之一。目前文献报道东莨菪碱模型均为一次性给药后即出现记忆损害,此改变可逆,属功能性改变。据报道,小鼠腹腔注射1~5 mg/kg东莨菪碱可造成获得性记忆障碍模型,其中常用剂量为2,3,5 mg/kg[5]。
Morris水迷宫实验是一种评价空间学习记忆能力的经典方法,是评价痴呆动物模型复制结果的客观指标[6]。Morris水迷宫由一金属圆柱形水池和自动显示、记录装置,以及安全岛(平台)组成。水池分为4个象限(东、南、西、北),平台放置于第二象限的中心。水温保持在(24 plusmn;2)℃,水面高出平台1.0cm。每只小鼠每天接受2次训练,分别从2个不同的入水点开始,2次训练间隔1 min,记录潜伏期(找到平台的时间)、找到平台的所经路程和小鼠游泳速度[7]。
远志药用历史悠久,始载于《神农本草经》[8]。远志为远志科植物远志或卵叶远志的干燥根,味苦、辛,性温,具有安神益智、祛痰开窍、消痈除肿等多种功效,临床上常用于惊悸、失眠健忘、痰阻心窍、咳嗽痰多等症的治疗。远志生品能“戟人咽喉”,因此远志一般需要经炮制后入药,远志的炮制方法众多,常用的有生品、甘草制和蜜制3种。中医临床研究和现代实验研究均表明远志具有改善记忆力的作用[9]。
远志中的主要成分是远志皂苷、远志碱、远志糖醇等,其中远志皂苷易刺激胃粘膜而引起恶心呕吐,并刺激肾脏而影响肾功能。甘草味甘,具有和解诸药毒性的功能。根据药理试验.用甘草汁制远志能减其燥性、缓和药性,并减轻或消除远志的毒副作用,从而达到补脾益气、安神益智的目的。蜜炙远志能增强润肺止咳的作用,但不能减除远志皂苷对胃粘膜和肾脏的刺激。因此,无论是在古籍中的炮制方法记载.还是现代常用的炮制方法,均以甘草汁制远志为主要方法。远志的炮制方法多种多样,均以减除其副作用为主要目的,当前仍以甘草汁制远志解毒为主[10] 。
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