人脐静脉内皮细胞培养方法
一、研究背景:
慢性肾功能衰竭是指慢性肾脏病引起的肾小球滤过率下降及与此相关的代谢紊乱和临床症状组成的综合征。慢性肾衰后期出现心力衰竭(Heart Failure,HF),即肾源性心肾综合征(Cardio-renal Syndrome,CRS),患者死亡率明显增加,预后较差。随肾衰病程进展,心脏负担逐渐加重,动脉血管内皮损伤及心肌舒缩功能损伤是导致心力衰竭的重要因素,成为肾衰并发症死亡的重要诱因之一。
血管内皮细胞紧密排列在血管内膜内,是血管内膜的主要结构,可以维持血管内膜的光滑,并防止有害物质侵入血管壁,是血管的通透性屏障。在创伤修复、调节血管张力、血栓形成、抗凝促纤溶、出血性疾病、动脉粥样硬化、炎症反应、糖尿病等一系列生理和病理过程中起重要作用,其协调血管平滑肌参与血管重构等方面也具有特殊意义。
内皮功能长期影响着血管的细胞修复,在内皮功能正常的情况下,生长抑制作用大于生长促进,但当内皮功能不全时促生长因子占优势,引起血管壁的重构,造成血管结构的改变,可引起血管壁凝血和循环功能障碍,与多种疾病发生密切相关。内皮功能不全加重心衰可能与多种机制有关:如增加心脏后负荷,减少冠脉灌注,加重动脉硬化损伤,导致外周血管血管重塑,限制骨骼肌的血流储备,从而降低运动耐量,潜在性影响心肌的结构和功能。目前认为内皮功能不全引起的血管舒缩功能异常可能是慢性肾脏病和心血管疾病进展的共同病理生理基础。因此,深入探讨血管内皮细胞损伤与修复的机制,对预防和治疗多种内皮细胞损伤诱发的心血管疾病有着积极意义。
在体外进行血管内皮细胞的培养是研究其生物学特性和多种疾病相关机制的一种普遍应用的实验方法。目前,利用内皮细胞模型研究其结构功能变化与疾病关系及探讨药物作用机制方面日趋活跃。
人脐静脉内皮细胞属上皮细胞,贴壁生长,具有容易获得、活力较好、生长周期较短、操作方便等特点,且与各种动物实验相比,其实验结果更符合人体的基本情况,更具有实际的意义。对人脐静脉内皮细胞的研究已经成为动脉粥样硬化以及其他血管疾病研究的重要方向。
因此,建立简便、经济、可收获足够数量及纯度高的人脐静脉内皮细胞、实验结果可靠的培养方法,不仅可以为大规模内皮细胞实验研究奠定基础,而且对内皮细胞生物学特性及心脑血管疾病的研究具有重要的意义。
二、研究方法:
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