一、选题依据
白血病是严重威胁人类健康的常见造血系统恶性肿瘤,在儿童和青年的恶性肿瘤中所占构成比最高,其死亡率较高且发病率随着年龄增长呈上升之势,给社会和家庭带来了严重危害。目前联合化疗是白血病治疗的重要措施,虽然人们对白血病的化疗采取了包括联合用药、早期、足量、分阶段治疗、加强支持治疗等综合治疗策略,然而白血病细胞多药耐药性的产生仍然使部分白血病的治疗最终归于失败,因此对于白血病多药耐药问题的研究迫在眉睫。大黄素是中药大黄的有效成分,具有抗炎、抗菌、免疫抑制作用,研究表明大黄素还是蛋白激酶抑制剂,能够抑制多种肿瘤细胞的增殖。本课题研究大黄素的几种蒽醌成分,并且评价其药效,为研制更多更为安全有效的肿瘤细胞多药耐药抑制剂提供实验依据,更为有效治疗慢性粒细胞性白血病做好基础。
二、实验目的
研究大黄中几种蒽醌类成分,大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸对人慢性粒细胞白血病耐阿霉素细胞株K562/A02以及耐伊马替尼细胞株K562/g01肿瘤多药耐药的抑制作用。评价大黄素中几种蒽醌成分的药效,为多药耐药抑制剂的开放提供依据。
三、实验方法
1、CML耐药细胞K562/A02的培养
亲本细胞K562敏感株、耐阿霉素细胞系K562/A02和耐伊马替尼细胞系K562/G01,均购自中国医学科学院血液病研究所(天津)。
K562/A02、K562/G01细胞用含10%胎牛血清RPMI 1640培养液,于37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养。K562/A02细胞需维持培养在含1mg/L阿霉素的培养液中,实验前无药培养2周;伊马替尼耐药的K562/G01细胞培养于含伊马替尼4M的培养体系中, 实验前培养于无药培养液中传代3次。
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