一、课题研究的目的和意义以及国内外研究的发展概况和趋势
1、课题研究的目的与意义
黄芩素又称黄芩苷元，或5，6，7-三羟基黄酮，是唇形科植物黄芩的干燥根分离出的单体、属于黄酮类化合物。其在结构上属于多酚类化合物，具有抗菌、抗病毒、保肝、利胆、利尿和降血脂作用，临床上主要用于急性、慢性炎症的治疗。目前发现其抑癌抗癌活性与其氧化与抗氧化活性、生物膜保护作用、线粒体毒性损伤、蛋白酶体抑制作用、信号调节功能等相关，并且在癌症预防和治疗上其以天然高效、低毒和不易产生耐药性的特点而备受瞩目。
关于黄酮类化合物抗癌机制的报道常见诸报端，事实上，这些黄酮类化合物在抗癌和诱发癌细胞凋亡上其促氧化活性比抗氧化活性起更为重要的作用，许多黄酮类化合物诱导癌细胞核DNA片段化不可逆损伤并促进癌细胞凋亡都是通过ROS介导的，而预防癌症发生方面黄酮类化合物其抗氧化和清除自由基特性显得更为重要。但关于黄芩素作用下ROS来源研究较少，本课题将深入研究黄芩素引起肝癌HepG2细胞ROS生成的机制及其下游通路，旨在加快很多黄酮类活性单体的药物开发。
2、国内外研究的发展概况和趋势
目前国内外有很多研究表明ROS对诱导肿瘤细胞凋亡起重要作用。GlaucioValdameri等人在实验中证实ROS的过度累积可以有效的诱导细胞的凋亡，发现了可以通过增加ROS产生来治疗癌症。许多研究表明某些天然产物能够增加ROS的产生，且其副作用和细胞毒性与化疗药物相比降低很多。相关研究表明黄芩素可以有效促进ROS的产生。目前通过诱导癌细胞HepG2细胞ROS的产生而引起细胞凋亡的研究成为热点。
癌细胞HepG2细胞ROS生成机制的研究报导有很多，药物一般通过增加细胞内Ca2 浓度以及通过NADPH氧化酶和线粒体激活JNK而产生ROS来诱导细胞凋亡。大量研究证实,黄芩素可诱导小鼠膀胱癌M B T - 2 细胞株、人肾癌细胞株( A-498 和RC-1) 、人非小细胞肺癌H460 细胞、人胃癌AGS 和MNK-28 细胞系、结肠癌和前列腺癌等肿瘤细胞的凋亡。Leung 等[13] 研究发现,人非小细胞肺癌H460 细胞用黄芩素培养48 h 后,多数细胞凋亡,Bcl-2 表达减少,而Bax、caspase 3 蛋白表达增加。研究人员还发现,黄芩素可促进人肝癌HepG2 细胞ROS的产生从而诱导肿瘤细胞的凋亡。
二、主要研究内容
本课题以癌细胞HepG2细胞为研究对象，通过使用不同浓度的黄芩素对细胞进行培养，利用MTT实验检测黄芩素对HepG2细胞毒效应的时间曲线和浓度（12,24,48,72h）曲线证明ROS升高与黄芩素的细胞毒效应的关系，进而检测细胞内ROS的来源。
三、主要研究方案（材料和方法）
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