开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
1拟研究或解决的问题
高血压是最常见的心血管疾病,是全球范围内的重大公共卫生问题。高血压最大的危害是晚期并发脑血管病、心脏病和肾功能衰竭,是一类严重威胁人类健康和预期寿命的疾病。由于高血压发病原因复杂,对于其发病研究以及相关的治疗方法一直是医学界的研究重点。
目前研究可知,高血压发病多与血管内皮细胞功能失调联系紧密。因此,探索血管内皮细胞的功能及其损伤机理尤为重要。近年来,一些降血压中药保护血管内皮细胞和其降血压的机制已成为研究心血管疾病的热点,目前研究的新前沿是细胞信号转导途径和相关功能蛋白质的分离与鉴定。
研究显示,草本植物川芎中的有效成分川芎嗪具有活血化瘀作用,对高血压具有良好的治疗作用。它能够明显提高血浆NO含量,降低ET-1含量,具有血管内皮细胞功能的作用,值得在临床中推广应用。但川芎嗪对血管内皮细胞保护作用的机理,及其降血压机制还有待进一步研究。
本实验应用现代生物技术研究重要作用机理,旨在研究川芎嗪对血管内皮细胞的保护作用及降血压机制,以指导后期川芎嗪作为高血压治疗药物的开发。
2采用的研究手段
本实验以人脐静脉血管内皮细胞ECV-304为研究对象,构建了细胞损伤模型,用川芎嗪处理细胞后,采用MTT法测定药物的细胞毒性,并检测MDA、LDH、NO等指标,再采用qRT-PCR测定药物对靶基因mRNA表达水平的影响、WesternBlotting技术测定信号通路中的关键蛋白,旨在阐明川芎嗪降血压作用的细胞、分子机制。
1细胞培养技术:复苏传代冻存
2MTT:接种细胞培养细胞呈色比色
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