1.拟研究的问题哺乳动物大脑边缘系统的重要组成部分是海马神经元，锥体细胞又是海马结构的重要组成，是老年痴呆等神经系统疾病的重要病变部位[1~2]，近期记忆、情绪及内脏功能调节都有海马神经元参与，分布特点具有板层结构，锥体细胞居中具有相对独立性，神经科学的理想模型主要采用海马神经元培养[3]。
成功构建海马神经元的原代培养技术可为探讨神经系统相关疾病的发病机制以及神经药物筛选提供良好的实验平台。
2.研究手段一、大鼠原代神经元细胞的提取提取胎鼠与新生乳鼠的海马神经细胞：培养细胞置于37 ℃、体积分数5%CO2的培养箱中培养，每3天传代1次，细胞贴壁达到70%时，以体积分数0.25% 胰酶消化传代。
二、大鼠原代神经元细胞生长曲线的测定二氧化碳培养箱中分别培养乳鼠与胎鼠的神经细胞并绘制各自的生长曲线三、药物干预对大鼠原代神经元细胞的影响1.观察两种受试药对大鼠原代神经元细胞的影响通过MTT法，结果以三线表形式列出2.观察两种受试药对大鼠原代神经元细胞缺氧缺糖模型的影响用三气培养箱构建缺氧缺糖模型，通过MTT法，结果以三线表形式列出3.药物A和B对大鼠原代神经元细胞NaNO2模型的影响用NaNO2造模，通过MTT法，结果以三线表形式列出四、MTT实验取对数生长期细胞，用含有体积分数10%小牛血清RPMI-1640 培养液调细胞5. 0 104 /mL，接种到96孔板，每孔100mu;L 即每孔5 000 个细胞，加入药物后终体积为150mu;L。
每组设5 个复孔，分别加入质量浓度分别为0、1、10、50、100、200mu;M 的药物。
置37 ℃、体积分数5% CO2培养箱培养48 h，取出孔板，每孔加入20mu;LMTT（5mg/ml） 试剂，微板振荡器振荡混匀，放入培养箱中继续培养，1 h后酶标仪检测各孔吸光度A450。
3.文献综述：海马神经元的首次体外分离培养于1977年Banker等首次获得成功，随后许多学者对海马神经元的体外分离实验进行研究，培养技术与方法取得迅速改进和提高[4~5]。
但在培养过程中纯度及培养时间一直是困扰学者的问题，值得探讨。
对于神经细胞的原代培养，学者常用大鼠作为培养来源。
因为大鼠神经系统比小鼠发达，其结构更接近于人类。
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