课题性质:radic; 基础研究
拟解决的问题:
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖,导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。现用高糖诱导刺激下的PC12细胞作为研究对象,因为PC12细胞是一个常用的神经细胞株,PC12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤,该细胞对神经生长因子(NGF)有可逆的神经元显形反应,PC12细胞是从大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆的细胞株,主要分泌产物为儿茶酚胺类递质包括多巴胺、去甲肾上腺素等。
膜上有NGF受体,受生理水平NGF诱导后,它们停止分裂,长出神经突起,分化为具有交感神经元特性的细胞,常被用于分析神经元分化和NGF作用分子机制的研究,也被用于研究生长因子调节神经细胞基因表达改变的机制。阿魏酸作为实验试剂,具有抗血小板聚集,抑制血小板5-羟色胺释放,抑制血小板血栓素生成,增强前列腺素活性,镇痛,缓解血管痉挛等作用。是生产用于治疗心脑血管疾病及白细胞减少等症药品的基本原料。本文研究阿魏酸对高糖诱导刺激的PC12细胞的保护作用,来为治疗糖尿病脑病的治疗。拟采用的研究手段:此研究分别从形态学变化水平,蛋白水平,基因水平三个层次进行探索,运用形态学观察,western blotting,免疫荧光等方法。论文
课题研究进度安排:
2017年3月06日----3月10日 确定选题,查阅文献,撰写开题报告。
2017年3月20日----4月25日 MTT法检测阿魏酸对PC12细胞活力的作用及高糖诱导下对细胞活力的检测。
2017年4月25日----4月30日 糖消耗测定。
2017年5月01日----5月10日 进行高糖诱导下培养PC12细胞,检测相关mRNA的变化,western blotting法检测信号通路相关蛋白的表达,明确阿魏酸对高糖诱导下的PC12细胞的作用机制。
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