文献综述
三相分离是一种新型蛋白质分离纯化技术, 具有盐析、共溶剂沉淀及等电点沉淀等特点。三相分离技术可选择性地将目的蛋白分配到一相中, 而杂蛋白和杂质被分配到其他相中, 从而达到蛋白纯化和浓缩的作用。与硫酸铵分级沉淀相比, 三相法无需分步多级沉淀和脱盐处理, 也无需柱层析的繁琐操作, 一步即可分离, 收率也较其他多步分离方法较高[1]。
过氧化物酶（peroxidasePOD）是由单一肽链与卟啉构成的血红素蛋白。它作为一种氧化还原酶，普遍存在于各种动植物和微生物体内。它具有参与植物体内活性氧的代谢、吲哚-3-乙酸（indole-3-acetic acid，IAA）的降解、木质素的合成等生理功能。当今，该酶的商品化生产主要来源于辣根，但其价格比较昂贵。[2-3]过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与植物代谢及抗逆性都有密切关系[4-6]。POD参与植物的生长发育，参与植物的抗逆过程，是果蔬成熟、衰老和品质下降的生理指标，同时POD与多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶共同作用，使果蔬发生褐变现象，导致果实色泽加深、营养损失，影响销售。[7-10]植物过氧化物酶易于提取,且不同种植物过氧化物酶具有差异性,故从不同植物中寻找低成本和酶学性质优良的过氧化物酶十分重要[11]。
过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶，它们能催化很多反应。[12]过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于载体的过氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢，氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用。[13]它广泛存在于生物界中，主要催化和有机过氧化物对多种无机物和有机物的氧化作用作为一种抗氧化剂，参与了生长激素的氧化、次生物质的代谢、细胞的木质化和植物防卫反应等多种生理反应过程该酶现已广泛应用于环保、食品工业、医学诊断、生物传感器等行业[14]。在生化研究方面，是酶标记法所用的一种主要酶，医药上用于测定生物体液中葡萄糖和半乳糖的含量，用作诊断酶。用于制作清除剂，通过负载酶体，作用于酚类、胺类、甲醛、甲苯等污染物质的降解消除。酶的理化性质，如最适pH、最适温度以及热稳定性和酸碱稳定性，在其应用中很重要．不同来源的过氧化物酶理化性质不一样。［15］
过氧化物酶是一种用途广泛的酶，根据来源不同将其分为3个基本的类型：动物过氧化物酶、植物过氧化物酶、真菌过氧化物酶。它是植物体内重要的呼吸酶类，其活性高低与酚类物质代谢，植物抗性密切相关。从环境生物学来说，测定过氧化物酶活性能了解植物的进化阶段，以及进化趋势。更重要的是能确定之物在特定环境下的适应能力。[16]
参考文献：
[1]魏胜华,周清华,钱伟,张驰.三相法制备木瓜蛋白酶的过程研究[J].现代化工,2017,37(10):114-117.
[2]李霞,韩凤,何睿,焦艳华,梁媛媛,陈灿玉,谢恬.番薯过氧化物酶的分离纯化及其性质研究[J].杭州师范大学学报(自然科学版),2011,10(03):253-257.
[3]Phanuphong Chaiwut,Punyawatt Pintathong,Saroat Rawdkuen.Extraction and three-phase partitioning behavior of proteases from papaya peels[J].Process Biochemistry,2010,45:1172-1175.
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