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基于蔗糖生物传感器的多酶体系固定化优化南京工业大学 生物与制药工程学院 ，江苏 南京 211800摘要：酶的固定化技术是指将天然游离酶限定在一定空间内或完全附着在某固态结构上能自由移动的一种生物技术，是一种常用、有效、便捷的生物酶修饰手段，对酶的活性和操作稳定性具有极大的改善和提升。
相比于游离酶而言，固定化酶在催化反应中具有较大优势。
因此，本文基于蔗糖生物传感器的多酶体系酶元件，找到最适多酶体系固定化方法及材料。
并在此固定化方法的基础上，比较固定化酶与游离酶的性质，优化固定化材料、浓度及固定化条件。
关键词：酶，固定化技术，固定化材料，固定化方法1 酶固定化前要考虑的因素酶是一类具有催化功能的蛋白质,与化学催化剂相比具有反应速度快、反应条件温和、底物专一性强,可在水溶液和中性pH下操作等优点,但同时也存在一些不足，如酶一旦从细胞中分离出来,其活性会迅速下降,由于酶是溶于水的,在水溶液中进行反应,会导致酶和底物、产物从水中分离的困难,不利于循环使用[1]。
生物传感器的酶元件为蔗糖酶、变旋酶、葡萄糖氧化酶三酶混合体系，酶量较大，对于酶元件的固定化存在较大的挑战。
目前固定效果最佳的为化学交联法，但化学交联剂对于部分酶的高级构具有较大的伤害，会导致不可逆的影响[2]。
因此，基于蔗糖生物传感器的多酶体系酶元件，需要选择最适固定化方法及材料。
2 实验部分2.1 多酶体系的获得可直接通过相应菌株培养获取。
2.1.1 酶活测定用动力学法测定单位时间内的酶促反应量，测得各个游离酶酶活。
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