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文献综述
摘要:基于PCR介导的基因敲除原理,采用Cre-LoxP敲除系统,对酿酒酵母细胞中ATP合酶d亚基进行敲除,构建ATP合酶d亚基缺陷型酿酒酵母模型,为酿酒酵母其他基因的敲除提供了可借鉴的方法。
关键词:酿酒酵母;基因敲除;Cre-LoxP敲除系统;ATP合酶亚基缺陷线粒体ATP合酶是线粒体氧化磷酸化的关键酶,其功能缺陷会导致能量代谢障碍相关的线粒体疾病。
线粒体ATP合酶是由多个亚基组成的蛋白复合物,其生物合成和组装是个复杂的生物过程。
酵母是研究线粒体ATP合酶结构、生物合成和组装机制的模式实验材料之一,且相关研究取得了很多进展。
本文对ATP合酶d亚基缺陷型酿酒酵母细胞模型的构建进行综述,以期为ATP合酶其他亚基敲除及相关线粒体疾病的研究提供理论借鉴和参考依据。
1 ATP合酶的亚基是否参与PTP合成表1酿酒酵母ATP合酶亚基组成图 1 酿酒酵母线粒体 ATP 合酶结构模式图酿酒酵母线粒体ATP合酶由F1,Fo和定子三部分组成。
F1 由 α、β、γ、δ 和 ε 这5种亚基组成,形成 α3β3γδε 的复合物. Fo由亚基 6、8、9、f 和 i/j 组成,定子部分包括亚基 b、d,h以及 OSCP。
亚基6和亚基9环之间的界面形成质子通道。
[1]人线粒体的通透性转换是指在内膜中非特异性通道的开放,称为通透性转换孔(PTP),钙离子可触发开放,导致细胞器肿胀,内膜破裂和ATP合成,继而导致细胞死亡[2]。
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