毕业论文课题相关文献综述
1.亮氨酸脱氢酶简介亮氨酸脱氢酶(Leucine Dehydrogenase,LDH.EC1.4.1.9)是一种NAD 依赖型的氧化还原酶,它可逆地催化L-亮氨酸和一些支链L-氨基酸反应生成对应的酮酸及其类似物。
该酶在芽孢杆菌中有较高表达水平,主要参与支链L-氨基酸的体内代谢。
另外,亮氨酸脱氢酶可用于支链脂肪酸及其酮酸类似物的测定[1]。
2.高活性亮氨酸脱氢酶菌种筛选 Bacillus cereus和Bacillus sphaericus属于常温菌株,但是从其体内分离得到的亮氨酸脱氢酶仍具有较高的热稳定性[2]。
从嗜热菌株中分离的亮氨酸脱氢酶具有更高的热稳定性。
来自Clos-tradiumthermoaceticum厌氧嗜热菌中的亮氨酸脱氢酶基因经克隆在大肠杆菌中表达,相比野生型,其活性提高了900倍[3]。
酶的热稳定为下游分离纯化过程提供了便利。
酶的高稳定性也有利于工业上的连续反应过程,因为酶活半衰期影响催化过程的经济性。
Ohshima[4]等研究比较了常温和高温亮氨酸脱氢酶生产亮氨酸的连续反应过程,研究显示高温亮氨酸脱氢酶比常温酶的热稳定性更强,在更宽的PH范围内显示活性。
3.IPTG诱导表达的作用原理: E.coli的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节 基因I(图15-4)。
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