一、课题背景
类胡萝卜素(Carotenoid)属于类萜化合物,是一类天然色素的总称,目前已经发现的类胡萝卜素约600多种。其中仅有约十分之一的类胡萝卜素可在小肠和肝细胞内转变成视黄醇和视黄醛,称为维素A原。如alpha;-胡萝卜素(alpha-carotene)、beta;-胡萝卜素(beta-carotene)、beta;-隐黄素(beta-cryptoxanthin)、gamma;-胡萝卜素 (gamma-carotene)等。而相当一部分类胡萝卜素不能分解形成维生素A,不具有维 生素A的活性,如玉米黄素 (zeaxanthin)、辣椒红素 (capsanthin)、叶黄素 (xanthophy11)和番茄红素 (Lycopene)[1]。由于没有beta;-胡萝卜素那样的beta;-芷香酮环结构 ,所以番茄红素不具有维生素A原活性,因此长期以来未受到重视。类胡萝卜素广泛存在于动植物、藻类、真菌和细菌中,且在某些行业中拥有大量的原料需求,比如医药保健品、精细化工行业以及饲料行业等。
类胡萝卜素不仅是植物体内的功能性分子,而且在动物和人类健康中也发挥着重要作用。实验研究表明,食用富含类胡萝卜素的食物可减少与老化有关的疾病发病率,比如冠心病、黄斑退化疾病以及某些癌症。但是动物和人体自身无法从头合成该类分子,只能从食物中摄取[2]。当人体摄取的类胡萝卜素不足时,就会导致体内类胡萝卜素的整体水平下降,因而容易患退化性疾病[3]。目前被认为在降低这类疾病的发病率上最有功效的是一种名为番茄红素的类胡萝卜素[4-5]。类胡萝卜素对这类疾病的抑制作用与它们的强抗氧化剂活性有关[6]。当抗氧化剂或类胡萝卜素摄取量或在血液中的含量较高时,白内障、老年性黄斑退化症(Age-related macular degeneration,AMD)发病率则较低,二者呈负相关。也就是说当摄取大量叶黄素和玉米黄质时机体患白内障的风险也会降低,但其他类胡萝卜素则无此功效[7]。
番茄红素作为一种重要的类胡萝卜素,存在于人类血浆和组织中,是类胡萝卜素中最有效的单线态氧淬灭剂,近来的诸多研究表明,番茄红素具有抗氧化和清除自由基、诱导细胞间隙连接通讯、抑制肿瘤细胞增殖、增强免疫力等多种重要生物活性,在抗癌防癌、预防心脑血管疾病、防止白内障、抑制诱变、保护皮肤等方面都有明显的作用[8-14]。因此番茄红素的生产和应用成为目前类胡萝卜素相关研究领域的热点[15]。
番茄皮富含多糖、类胡萝卜素等营养健康成分。生物活性研究显示其具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤以及增强免疫功能等多种活性,应用前景良好。但目前对番茄皮生物活性物质的研究较少,本项目拟对番茄皮中类胡萝卜素粗提物进行初步分离纯化并探索其抗氧化活性,旨在为番茄皮功能的进一步开发利用提供基础。
- 要解决的问题
- 影响类胡萝卜素提取的因素,如提取液组成,料液比,温度,pH,提取时间等;
- 番茄皮类胡萝卜素粗提取物所含杂质的成分及含量鉴定;
- 粗提取物分离纯化所需要的条件,如柱层析方法、洗脱剂、柱填料、上样量参数的确定;
- 类胡萝卜素的抗氧化活性初步评价。
- 可行性分析
- 研究方案和研究技术具有可行性;
试验所采用的方法具有文献支持,可以协助解决课题中中所涉及到的关键技术和难点问题。加上研究目标明确,工作基础扎实,实验方案具有较强的可操作性,取得预期成果的可能性很大。
- 实验条件与设备具有保障;
所在实验室能够提供课题所需的合格实验仪器与实验环境,能够满足课题开展所需的要求,为开展实验提供必要硬件保障。
综上可知,本课题在研究思路、研究方案、研究人员以及硬件条件方面均具有可行性,能够完成预期目标。
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研究方法和内容
- 番茄皮类胡萝卜素的提取
4.1.1 番茄红素标准曲线
番茄红素标准溶液浓度分别为20.0、40.0、60.0、80.0、100.0 mu;g/mL,每个系列浓度进样3次,以吸光度和浓度作线性回归,得到番茄红素吸光度标准曲线。
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