开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、拟研究或解决的问题
通过优化离子交换层析条件,去除重组人干扰素alpha;1b原液中的相关蛋白、异构体,从而进一步提升纯化获得的重组人干扰素alpha;1b原液乃至由此制备的重组人干扰素alpha;1b注射液的药品质量。
二、采用的研究手段
1、重组人干扰素alpha;1b的相关蛋白质、异构体与重组人干扰素alpha;1b的理化性质很相似,鉴于离子交换层析是最重要的层析种类,且可供选择优化的试验条件众多,因此在前期文献调研与试验工作的基础上本研究拟通过优化CM弱阳离子、DEAE弱阴离子交换层析的条件来去除重组人干扰素alpha;1b中的异构体与相关蛋白质。
2、离子交换层析可采用的洗脱方法有pH、盐梯度洗脱和分步洗脱,在对以往文献查阅与初步试验的基础上,以此为纯化优化方向进行研究。
3、AKTA蛋白纯化系统是当前蛋白纯化工作经常用到的一组设备,自动化程度很高。因而初步采用此类设备进行重组人干扰素alpha;1b分离纯化方法的优化研究。
4、检测蛋白的分离纯化有浓度、纯度、活性、收率等几个指标,因此拟采用紫外分光光度计、SDS-PAGE电泳、高效液相色谱、细胞病变抑制法等方法对层析收样进行检测。
三、文献综述
1、课题背景
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