开题报告内容:
一、研究背景
人成纤维细胞因子21(Fibroblast Growth Factor 21,FGF)是人成纤维细胞因子(FGF)家族的一个非典型成员。FGF21可以降低血糖,平衡脂肪代谢和能量消耗,可作为治疗糖尿病和肥胖等病状的一个潜在的治疗药物。FGF21是FGF家族中唯一一个没有促有丝分裂基因的成员,它不会促进成纤维细胞的生长,因而临床用药风险低。然而,FGF21在体内稳定性较差,静脉注射体内半衰期仅有半小时,这严重影响了FGF21的临床研究与应用。
聚乙二醇修饰及PEG修饰,是目前制备长效化蛋白质和肽类分子的一项重要技,是用来解决或缓解蛋白质和多肽在药用过程中出现的多种问题的有效途径。影响PEG修饰过程的主要因素有:蛋白质与PEG修饰剂的摩尔比、修饰反应的pH值和离子强度、修饰反应温度、修饰反应持续时间。
通过此课题,期望可以得到较为纯净的长效化FGF21蛋白候选分子,及PEG修饰FGF21。
二、研究目的及意义
本课题选择FGF21作为研究对象,在前期已纯化好的原型FGF21的基础上,通过对不同修饰条件的摸索,得到最适合的PEG修饰FGF21的修饰条件,纯化出PEG修饰FGF21。并对其理化性质和生物活性进行初步研究。
1、PEG修饰FGF21反应条件的优化
将冻干后的样品溶解至1 mg/mL,标示为蛋白样品,而后利用上述蛋白样品,对PEG修饰条件进行优化平行实验。
(1)摩尔比
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