CRISPR/Cas9多肽抑制剂的研发及应用文献综述

 2022-12-25 11:17:37

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、课题背景

1.CRISPR/Cas 系统

1.1 CRISPR/Cas 系统的结构与组成

CRISPR/Cas是一种成簇的规则间隔回文重复,系统包含CRISPR重复序列(以规则的间隔形式形成交替重复元件),CRISPR间隔序列(可变序列)以及CRISPR相关基因(cas) , Cas 基因种类丰富,在不同的 CRISPR/Cas 系统中具有不同的 Cas 蛋白,可以编码 Cas 核酸酶,具有识别以及切割目的DNA 的作用。它是目前发现存在于大多数细菌与所有的古菌中的一种后天免疫系统,以消灭外来的质体或者噬菌体。

1.2 CRISPR/Cas 系统的作用机制

(1)适应或间隔物的获取阶段

此阶段包括4种CAS蛋白,分别是CAS1 ,CAS2,CAS4,CAS9.首先通过识别原间隔物邻近基序PAM(通常只有几个核苷酸长,并且在CRISPR CAS系统的变体之间是一样的)。其次CAS1蛋白(是一种采用独特的alpha;螺旋折叠的整合酶)切割重复片段中的特定位点来介导新的间隔区插入 CRISPR 阵列,然后cas2和cas1蛋白形成了复合物,它是RNA干扰物的同系物,目前对于它的作用机制还不太清楚。

(2)cr RNA 表达与处理阶段

在CRISPR/Cas TypeⅡ类型的细胞中,cr-RNA是在 tracrRNA的指导下,通过核糖核酶Ⅲ由pre-crRNA加工成熟而来。

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