1. 导言
菌属的微真菌被认为是世界上最重要的植物病原体(Dean et al., 2012)。由Colletotichumsp引起的炭疽病,影响广泛的商业作物和植物,主要存在于热带和亚热带地区((Waller, 1992)。杀菌剂,包括多菌灵、硫代硫酸甲酯、苯菌灵、马奈布 、百菌清和曼可泽布,是控制炭疽病的常规手段(Mahoney amp; Tattar, 1980)。然而,化学杀菌剂的使用增加了真菌菌株对杀菌剂的抗药性(Howarth, 1991; Peres, Souza, Peever, amp; Timmer, 2004)。此外,化学品在农业和林业中的广泛使用一直是公众关切和安全的问题,因为这可能对环境和非目标生物产生有害影响。因此,需要开发控制植物疾病的替代方法,已成为研究的优先事(Heydari amp; Pessarakli, 2010)。利用拮抗微生物进行生物控制已成为管理植物疾病的一种对环境友好方法(Pal amp; Gardener, 2006)。
芽孢杆菌是孢子形成菌属,革兰氏阳性,棒状细菌。芽孢杆菌的许多成员可以产生生物活性分子来抑制植物致病生物((Ahmad, Ahmad, amp; Khan, 2008; Glick, 1995)。在这些抗菌化合物中,分解酶、毒素和脂肽已被证明能有效地抑制植物病原体的生长((Choudhary amp; Johri, 2009; Chowdhury,Hartmann, Gao, amp; Borriss, 2015; Pinchuk, Bressollier, Sorokulova, Verneuil, amp; Urdaci,2002)。此外,已知有几种芽孢杆菌通过诱导系统抗性和/或争夺入侵地点等方式保护植物免受各种病原体的侵害(Jourdan et al., 2009; Kloepper, Ryu, amp; Zhang, 2004)。这些优点使芽孢杆菌属适合作为潜在和有效的生物控制剂,可持续的病原体控制和植物生产。
Bacillus velezensis, Bacillus methylotrophicus, Bacillus amyloliquefaciens, and Bacillus oryzicola 等在世界范围能被广泛制作为拮抗剂,并被商业化。 (Chen et al., 2009; Dunlap, Kim, Kwon, amp; Rooney, 2016)这些菌株属于同一物种(Dunlap, Kim, Kwon, amp; Rooney, 2015; Dunlap et al., 2016)。它们通过直接抗虫病或植物介导的抗病性具有相同的抗真菌机制(Chowdhury et al., 2015; Dunlap et al., 2016; Kim, Lee, Weon, Sang, amp; Song, 2017)。因为B.velezensis的有效出版物早于另一种出版物B. 选择velezens作为当前名称(Dunlap et al., 2016)。
日本羽扇豆属(Celastraceae)是一种常绿阔叶灌木,广泛用作公园、校园和景观
的观赏植物(Huang, Li, Zhang, Li, amp; Ye, 2016)。然而,灌木经常受到昆虫和微生物的影响,这些昆虫和微生物会导致严重的破坏(Yi, Li, amp; Ouyang, 2002)。由粘孢子 虫引起的炭疽病是日本刺叶的一种主要真菌病(Huanget al., 2016)。 然而,这种疾病的控制主要取决于杀菌剂,而应用从日本刺叶分离的拮抗剂来控制炭疽病的报道很少。 因此,本研究的主要目的是从日本刺叶分支的内部组织中筛选出潜在的拮抗细菌,并评价细菌代谢产物对黑孢子虫入侵结构和细胞壁修饰的影响。
2. 材料和方法
2.1. 真菌分离物
病原菌C. gloeosporioides s.s. strain HYCG2-3(Huang et al., 2016)被用来感染日本刺叶。南京林业大学森林病理学实验室提供了其他真菌病原体,如higginsianum strain IMI 349063, the Magnaporthe oryzae strain Guy11, Alternaria sp.,
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